张崇文，毛芝娟，于涟

1 上海市水产研究所，上海 2004332 浙江万里学院，浙江 宁波 3151003 浙江大学动物科学学院，浙江 杭州 310058

大黄鱼三种病原弧菌外膜蛋白交叉保护性抗原筛选

张崇文1，毛芝娟2，于涟3

1 上海市水产研究所，上海 200433
2 浙江万里学院，浙江 宁波 315100
3 浙江大学动物科学学院，浙江 杭州 310058

张崇文，毛芝娟，于涟. 大黄鱼三种病原弧菌外膜蛋白交叉保护性抗原筛选. 生物工程学报, 2012, 28(12): 1460−1472.

Zhang CW, Mao ZJ, Yu L. Selection of cross-protective antigens from outer membrane proteins of three pathogenic vibrios isolated from infected large yellow croaker (Pseudosciaena crocea). Chin J Biotech, 2012, 28(12): 1460−1472.

弧菌是海水养殖环境中常见的条件性致病菌，弧菌病的暴发给水产养殖业造成了严重损失。鉴于水生动物尤其是鱼类弧菌病的发生常常是多种 (血清型或亚种) 弧菌的混合感染，筛选具有潜在的交叉保护性蛋白抗原，作为制备多价疫苗或联合疫苗的侯选成分具有重要意义。文中从患病大黄鱼中分离到8株弧菌，经生理生化和分子生物学鉴定分别为6株哈维氏弧菌Vibrio harveyi，1株溶藻弧菌Vibrio alginolyticus和1株副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus。选择典型的不同种的弧菌为代表，提取其外膜蛋白，经SDS-PAGE和Western blotting分析，确定它们大约在45 kDa、35 kDa、22 kDa处出现了3条共同的免疫印迹条带，表明它们很有可能含有共同的能够彼此交叉保护的抗原。利用双向电泳和免疫印迹相结合的方法，借助于MALDI-TOF-MS质谱分析技术，发现溶藻弧菌V. alginolyticus的一种功能未知的孔蛋白 (Porin, GenBank Accession No. ZP_01260407)和副溶血弧菌V. parahaemolyticus的一种麦芽糖孔蛋白的前体蛋白 (Maltoporin precursor，GenBank Accession No. NP_801154) 能够和哈维氏弧菌V. harveyi全菌多抗产生免疫反应，表明这两种蛋白可以作为3种弧菌的交叉保护性抗原，以此制备的疫苗可望对3种弧菌的感染产生交叉保护作用。……