刘 勇，方鹏飞，欧阳宇艺

（四川省华派生物制药有限公司，四川 简阳 641400）

兔病毒性出血症俗称兔瘟，是由兔病毒性出血症病毒（RHDV）所致的一种兔急性、败血性、高度接触性、致死性和以全身实质器官出血为主要特征的传染病，尤以长毛兔最为易感，主要侵害2月龄以上的青壮年兔。本病于1984年初首先在我国江苏等地暴发，随即蔓延到全国多数地区。RHDV属杯状病毒科，病毒粒子呈球形，直径32～36 nm，为十二面体对称，无囊膜。RHDV与其他杯状病毒相比血凝特性显著，能凝集人类的各型红细胞。本试验对成都龙泉某兔场疑似出血症发病死亡的兔的病料进行病原分离鉴定，以确诊是否为兔病毒悸出血症感染。

1 材料与方法

1.1 试剂 改良马丁琼脂、麦康凯琼脂、厌气肉肝汤培养基，由青岛海博生物技术有限公司提供；甲醛，由成都市科龙化工试剂厂提供；人“O”型红细胞，由本公司“O”型血同事提供。

1.2 毒种 兔病毒性出血症病毒北京株，由中国兽医药品监察所提供。

1.3 RHDV抗血清 由本公司质量管理部自制。

1.4 试验兔 日本大耳白兔，体重2.0kg，由四川省实验动物专委会养殖场提供。

1.5 细菌学检查 对无菌采集的病料进行细菌学分离培养，接种含4%血清及0.1%裂解全血的改良马丁琼脂平皿、麦康凯琼脂平皿、厌气肉肝汤，37℃下培养5日，观察记录结果。

1.6 RHDV LQ株的血凝性试验 采用微量法。先将病料肝脏1份加9份生理盐水研磨，离心取上清备用；再取25μL上清在96孔板上作倍比稀释，每孔加入25μL 1%人“O”型红细胞悬液；并设立红细胞对照孔，以红细胞100%凝集的最高稀释度作为判定终点。……