赵 竞,金可可,吴 亮,陈国荣,李剑敏△

(1.温州医学院病理生理学教研室,温州 325035;2.温州医学院附属第一医院病理科,温州 325003)

糖尿病可导致糖尿病脑病(diabetic encephalopathy,DE)目前已成共识[1],其主要特征表现为认知功能减退、学习记忆力减弱、智力降低、情绪障碍等精神功能紊乱。近几年来,神经营养因子对影响认知的中枢胆碱能神经元的神经营养支持作用、抑制细胞的凋亡、调节突触可塑性等作用在糖尿病脑病中特别引起研究者关注,而且认为神经营养因子的缺乏是糖尿病脑病的病理机制之一[2]。神经营养因子的缺乏导致神经生存转导信号的异常,Bax表达增强、Bax/Bcl-2比值增大引发凋亡级联反应使神经元凋亡[3]。

我们前期的实验发现银杏叶提取物(extract of Ginkgo biloba,EGB)可通过降低海马Bax的表达、减小Bax/Bcl-2比值从而减少神经细胞的凋亡,提高神经细胞的密度,保护I型糖尿病大鼠的认知功能的损伤[4]。但EGB对糖尿病大鼠海马的抗凋亡作用是否与其影响糖尿病大鼠海马神经元的神经营养因子的表达有关,有待进一步证实。本课题用STZ诱导I型糖尿病模型,进一步研究EGB对海马神经神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)表达的影响,探讨EGB对糖尿病脑病的保护机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂和设备

链脲佐菌素(streptozocin,STZ)及枸橼酸钠分析纯购于美国sigma公司;银杏叶提取物(EGB)购于北京双鹤高科天然药物有限公司,批号:100718;兔抗鼠NGF、NT-3多克隆抗体及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔二抗购于北京中杉生物技术有限公司;NGF、NT-3、及β-actin引物合成并订……