王丽华,王国辉,金玉玲,秦丽红,王志群

(佳木斯大学附属第一医院神经一科,黑龙江 佳木斯 154003)

随着中国老龄社会化的加快,痴呆是影响老年人生活健康的重要疾病之一[1]。近年来,细胞外信号调节的蛋白激酶(ex tracellular signal regulated protein kinase,ERK)通路在神经元凋亡方面的作用引起了国内外的广泛关注。人参皂苷三七总皂苷是从中药三七中提取的有效活性成分,并精制备成临床应用中药三七提取物制剂,临床应用的机制可能有活血化瘀、通筋活络之功效。本实验通过三七制剂对血管性痴呆大鼠动物模型 ERK的影响,初步探讨三七制剂脑保护方面的可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物分组及给药:Wistar雄性大鼠24只,鼠龄3～5个月,体重 300～ 350g,由佳木斯大学实验动物中心提供。动物分组及给药:测试合格后把合格大鼠随机分为正常对照组:不予任何处置;假手术组(除不结扎双侧颈总动脉,余处理同模型组);模型组 (血管性痴呆大鼠动物模型 );治疗组(三七制剂灌胃组);每组6只。

1.1.2 试剂:SP免疫组化试剂盒、兔抗鼠 ERK多克隆抗体、DAB显色试剂盒,均由北京中衫金桥生物技术有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 模型建立:参考黄新武等[2]建立血管性痴呆大鼠动物模型。

1.2.2 制作实验大鼠的脑组织标本。

1.2.3 HE(苏木精-伊红)染色。

1.2.4 免疫组织化学染色。

1.3 统计学方法

采用 SPSS16.0统计软件进行数据分析,所得数据以均数±标准差 (± s)表 示,组间比较采用 t检验,检验水准P＜0.05。

2 结果

2.1 一般行为学观察

手术前各组大鼠各方面活动、饮食、二便正常,毛发有光泽。制作血管性痴呆大鼠模型时,大鼠在颈总动脉结扎后出现短暂肢体抽搐,皮肤温度降低,术后早期大鼠精神状态差、少动、平衡能力差 ,随后出现嗜睡、饮食差、毛发有脱落;对照组变化不明显。……