氧化苦参碱对结肠炎模型大鼠结肠黏膜NOD2与TNF-α的影响*
2012-08-23唐庆范恒胡慧寿折星刘星星
唐庆,范恒,胡慧,寿折星,刘星星
(华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科,武汉430022)
近年来,我国炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)尤其是溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的发病率呈逐年上升趋势[1]。该病治疗难度大,愈后易复发,被世界卫生组织列为难治病之一。UC发病与环境、遗传、肠道黏膜免疫功能失调等多种因素有关。NOD2蛋白是一种新发现的细胞内病原相关模式识别受体(PRRs),NOD2能识别细菌细胞膜酸二肽,介导核因子κB(neclear factor-κB,NF-κB)的激活与α肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)等的表达[2-3]。已有研究表明,NOD2蛋白与UC发病密切相关[4-5]。笔者在本实验中采用三硝基苯磺酸(trinitrobenzene-sulfonic acid,TNBS)制备大鼠UC模型,采用氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)治疗,检测大鼠结肠黏膜NOD2和TNF-α表达情况。
1 材料与方法
1.1 材料雄性SPF级SD大鼠32只,体质量(250±20)g,购自华中科技大学同济医学院实验动物中心,实验动物生产许可证号:SCKY(鄂)2004-0007,实验动物使用许可证号:SYXK(鄂)2004-0028。TNBS购自Sigma公司(批号:P2297)。NOD2山羊抗鼠多克隆抗体购自SANTA CRUZ公司。大鼠TNF-α酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司。美沙拉嗪由法国爱的发制药集团生产。苦参素注射液(有效成分为OMT)由天津市生物化学制药厂生产,OMT纯度达98%。
1.2 动物分组将大鼠随机分为对照组、模型组、OMT组、美沙拉嗪组,每组8只。对照组从实验开始至实验结束正常饮水、喂食,其他3组用TNBS造模。造模后24 h,模型组肌内注射等体积0.9%氯化钠溶液;OMT组给予OMT肌内注射,63 mg·kg-1·d-1[6];美沙拉嗪组给予美沙拉嗪纯化水溶液灌胃,0.42 g·kg-1·d-1,均给药15 d。第16天开始,禁食24 h后处死大鼠。
1.3 造模方法大鼠适应性饲养1周,禁食不禁水24 h,10%水合氯醛按0.3 mL·(100 g)-1腹腔注射麻醉。……
