高华峰，信爱国，高 林，杨仕标

（云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室，昆明 650024）

小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)是副粘病毒科、麻疹病毒属的成员，因主要感染小反刍动物而得名，特别是山羊高度易感。国际动物卫生组织（OIE）将PPRV感染列为A类疫病，中国也将其列为一类动物疫病。该病主要在非洲及中东地区流行，近年来在中国周边国家频繁发生，自2007年西藏自治区首次报道该病疫情以来，现已严重威胁我国畜牧业的健康发展[1-3]。

血凝素蛋白H蛋白是小反刍兽疫病毒的结构蛋白之一，又称附加蛋白，构成病毒的纤突，含609个氨基酸，是最易变异的蛋白，这种高度的变异性可能是免疫压力选择的结果。H蛋白同时具有血凝素和神经氨酸酶的功能，且含有T细胞决定簇，可能与宿主细胞的特异性有关。H蛋白在病毒与细胞膜结合过程中作为受体，是引起细胞病变(cytopathic effect, CPE)的决定因素[4]。

1 材料与方法

1.1 材料 大肠埃希氏菌DH5α、DH10Bac（含Bacmid和Helper）、转座质粒pFastBacHT、小反刍兽疫病毒N75/1弱毒疫苗株及全长cDNA文库由云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室保存。

1.2 细胞与培养基 昆虫传代细胞系Sf9为云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室保存；Grace's昆虫培养基及胎牛血清购自Gibco公司。

1.3 酶及试剂 各种工具酶均购自TaKaRa（大连）生物工程工司；蛋白质分子量标准购于晶美公司；PCR产物回收试剂盒及凝胶回收试剂盒为上海生工产品；IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）为Promega公司产品；组氨酸His单抗、碱性磷酸酶标记的羊抗鼠二抗购自碧云天；引物合成及DNA测序由上海生工完成。……