郭露铰，徐成刚，贾伟新，刘大伟，王雪洁，任 涛

（华南农业大学兽医学院 农业部新兽药创制重点开放实验室，广州 510642）

传染性法氏囊病（infectious bursal disease,IBD）是由传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus, IBDV）引起的危害雏鸡的一种急性、高度接触性、病毒性传染病[1]。IBDV主要侵害鸡的中枢免疫器官，导致免疫抑制，从而增强机体对其他病原体的易感性[2,3]。自从1979年在北京、上海和广州等地报道该病以来[4,5]，目前IBDV标准毒株、超强毒株及变异株在中国并存，导致免疫过IBDV疫苗的鸡群发病的情况经常发生，给防疫该病带来了较大的困难。

IBDV属 双RNA病 毒 科（Birnaviridae） 双RNA病毒属（Birnavirus）[6,7]。基因组包括A、B两个片段，编码VP1到VP5 五种病毒蛋白，其中由A片段编码的VP2是病毒的主要保护性抗原，与病毒中和抗体的诱导、抗原的变异以及毒力有关[8]。

通过对不同毒株VP2氨基酸序列比对发现，在VP2蛋白206～350位区域内的氨基酸变化较大，称为IBDV高变区[9]。本研究应用RT-PCR技术对近几年广东省IBDV分离株的VP2基因高变区进行扩增及测序分析，从分子水平探讨广东省IBDV分离株的流行情况，为更好地防制该病提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 毒株 8株IBDV分离毒为2009～2011年期间分离自广东省的传染性法氏囊病发病鸡场，具体背景见表2。

1.1.2 菌株、质粒和试剂 大肠杆菌DH5α菌株由华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室提供；RNAiso Reagent、dNTP、SuperscriptTM RT-PCR Systems试剂盒、TaKaRa ExTaqDNA Polymerase、DNA Marker（DL 2000）等购自TaKaRa(大连)公司；DNA凝胶纯化试剂盒为天根生化科技（北京）有限公司产品；质粒抽提试剂盒为Omega Bio-Tek公司产品；琼脂糖、胰蛋白胨（Tryptone）、酵母浸出物（Yeast Extract）为OXOID产品；其他常规试剂均为国产分析纯试剂。……