崔延义，石爱平，许 宁＊，金美善，张小军，汪 岩＊

（吉林大学 白求恩第一医院1.泌尿外科；2.普外科；3.病理科，吉林 长春 130021）

S100A8在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

崔延义1，石爱平2，许 宁1＊，金美善3，张小军1，汪 岩1＊

（吉林大学 白求恩第一医院1.泌尿外科；2.普外科；3.病理科，吉林 长春 130021）

目的 探讨S100A8在膀胱移行细胞癌（BTCC）组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测68例BTCC和10例癌旁正常膀胱组织中S100A8蛋白的表达，并分析其与BTCC临床病理特征的关系。结果S100A8蛋白在BTCC组织中表达阳性率为55.9%（38／68），10例癌旁正常膀胱组织中表达均为阴性，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）；在低度恶性倾向尿路上皮乳头状瘤＋低分级BTCC组织中表达阳性率为29.2%（7／24），高分级BTCC组织中表达阳性率为70.5%（31／44），两组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）；在pTa-pT1期和pT2－pT4期表达阳性率分别为46.9% （23／49）和78.9%（15／19），两组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；在复发性BTCC组织和初发性BTCC组织中表达阳性率分别为72.7%（16／22）和47.8%（22／46），两组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论S100A8蛋白表达阳性率在BTCC组织中明显高于癌旁正常膀胱组织，其表达与BTCC的病理分期、分级呈正相关，随病理分期、分级的增高，S100A8蛋白表达阳性率增高，提示S100A8蛋白的表达与BTCC的发生、发展密切相关。检测S100A8蛋白有助于BTCC预后的评估。

膀胱移行细胞癌；S100A8；免疫组织化学

（ChinJLabDiagn，2012，16：0234）

S100A8蛋白与人类多种肿瘤有关，如乳腺癌、甲状腺癌、胃癌、结直肠腺癌、胰腺癌、前列腺腺癌，食管 鳞 状 细 胞 癌、宫 颈 鳞 状 细 胞 癌 等［1－7］。但S100A8在膀胱移行细胞癌（BTCC）中的表达及其临床意义的研究，目前国内尚未见报道。我们采用免疫组织化学方法检测68例膀胱移行细胞癌和10例癌旁正常膀胱组织中S100A8蛋白的表达，并分析其与膀胱移行细胞癌临床病理特征的关系。

1 材料与方法

1.1 临床资料选取吉林大学第一医院在2008年12月－2010年12月期间，手术治疗的膀胱移行细胞癌患者68例蜡块标本，男51例，女17例；年龄35－86岁，平均64岁。其中膀胱全切患者15例，经尿道膀胱肿瘤电切除患者53例。术后均经病理证实为BTCC。入组标准：①肿瘤组织直径大于1.0cm，②无其它肿瘤病史。68例BTCC病理分级根据WHO 2004分级标准：低度恶性倾向尿路上皮乳头状瘤（papillary urothelial neoplasms of low malignant potential，PUNLMP）6例；低分级18例；高分级44例。病理分期根据国际抗癌协会2009TNM分期标准：pTa 28例；pT121例；pT211例；pT36例；pT42例。非肌层浸润性（pTa-pT1）49例，肌层浸润型（pT2－pT4）19例。其中复发性膀胱癌22例。同时选取膀胱全切除标本距肿瘤边缘2 cm以上，经病理证实为正常膀胱组织10例作为对照组。每个石蜡标本切片3张，4μm厚，备染色。阳性对照为宫颈癌蜡块标本3例，取自我院病理科。

1.2 试剂兔抗人／小鼠S100A8单克隆抗体购自美国Epitomics公司。UltraSensitive TM S-P超敏试剂盒（鼠／兔）（包含内源性过氧化酶阻断剂，动物非免疫血清（羊），生物素标记的羊抗鼠／兔IgG，链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶）与DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。

1.3 方法采用免疫组织化学SP法检测，染色步骤按试剂盒说明进行。S100A8抗体稀释浓度为1∶100。以宫颈癌组织作阳性对照，以PBS液代替一抗作阴性对照。

1.4 判断标准阳性结果为比较鲜明的棕黄色染色，充满胞浆，弥散分布。每张切片随机选取5个高倍视野，每个高倍视野计数100个癌细胞，计数阳性细胞百分数并进行评分：0分（0%），1分（1－25%），2分 （26－50%），3 分 （51－75%），4 分 （76－100%）；根据染色强度评分：0分为未着色，1分为轻度色，2分为中度色，3分为重度着色。染色强度评分与阳性细胞数评分相乘，0－4分为阴性表达，5－12分为阳性表达。

1.5 统计学分析采用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析。采用χ2连续校正检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

免疫组织化学显示，S100A8蛋白表达阳性染色主要定位于肿瘤细胞质中，为细胞质弥漫性淡黄色或棕黄色，如图1、2。在癌旁正常膀胱组织中表达阴性，如图3。S100蛋白表达与BTCC临床、病理的关系见表1。S100A8蛋白表达阳性率的比较在BTCC组织和癌旁正常膀胱组织比较，在非肌层浸润性BTCC和肌层浸润性BTCC组织比较，在低度恶性倾向尿路上皮乳头状瘤＋低分级BTCC组织和高分级BTCC组织比较，差异均有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。随病理分期、分级增高，S100A8蛋白表达阳性率增高。在复发性BTCC组织和初发性BTCC组织比较，在不同性别间、不同肿瘤数目间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

图1 免疫组化方法，S100A8蛋白在BTCC组织中高表达400×

图2 免疫组化方法，S100A8蛋白在BTCC组织中低表达400×

图3 免疫组化方法，S100A8蛋白在癌旁正常膀胱组织中表达阴性200×

3 讨论

S100A8蛋白是S100蛋白家族成员之一，由93个氨基酸组成，分子质量为10835Da，常以二聚体形式存在。Yao、Tolson等［8，9］研究发现，S100A8蛋白在膀胱癌中表达上调。本实验结果显示：S100A8蛋白在BTCC组织中表达阳性率为55.9%，10例癌旁正常膀胱组织中表达均为阴性，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。与 Yao、Tolson等报道相一致。提示S100A8蛋白表达可能与BTCC发生有关。

Kim 等［10，11］通过研究S100A8在浸润性膀胱癌和非浸润性膀胱癌中的表达，发现S100A8高表达与肿瘤的侵袭性有关，提示S100A8高表达是肿瘤向浸润性进展的分子指标之一。Ha等［12］研究发现非浸润性膀胱癌患者中有浸润进展的S100A8mRNA水平明显高于没有浸润进展的膀胱癌患者，S100A8是评价膀胱癌预后的独立参数。Minami等［13］研究表明S100A8在肌层浸润性膀胱癌与非肌层浸润性癌的表达阳性率分别为38.3%、5.9%，两组比较（P＜0.015），差异有统计学意义。本实验结果显示：S100A8蛋白在pTa-pT1期和pT2－pT4期表达阳性率分别为46.9%和78.9%，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。与文献报道相一致。提示检测S100A8蛋白的表达水平对BTCC患者的预后评估有参考价值。

表1 S100A8蛋白表达与BTCC临床、病理的关系［例（%）］

Minami等［13］研究表明S100A8蛋白在 G1＋G2与G3膀胱癌组织中表达阳性率分别为21.6%、40.0%，两组比较，差异无统计学意义。本组研究对BTCC的病理分级采用了WHO 2004病理分级标准，在低度恶性倾向尿路上皮乳头状瘤＋低分级BTCC与高分级BTCC中S100A8蛋白表达阳性率分别为29.2%、70.5%，两组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。与Minami等文献报道结果不一致，目前国内外尚未见更多相关文献报道，其结果有待进一步研究证实。

本研究结果还显示：S100A8蛋白表达阳性率在复发性BTCC和初发性BTCC中分别为72.7%、47.8%，在复发性BTCC中表达有升高趋势，但无统计学意义。目前国内外尚未见相关文献报道，本实验结果，尚需进一步研究证实。

膀胱癌的复发与浸润进展是临床治疗中两大亟待解决的课题。目前临床工作中主要依据肿瘤的病理分级和分期预测肿瘤的预后，而病理分级和分期对预测膀胱癌的生物学行为存在一定的局限性。本研究结果提示S100A8蛋白的表达与BTCC的发生、发展密切相关。因此，我们认为，进一步探讨S100A8导致BTCC发生、发展的分子机制，有望成为BTCC预后评估新的分子指标，也可能为BTCC的靶向治疗提供新的靶点。

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Expression of S100A8protein in human bladder cancer and its clinical significance

CUIYan-yi，SHIAi-ping，XUNing，etal.（TheFirstClinicalCollegeofNormanBethuneMedicalDivision，JilinUniversity，Changchun130021，China）

ObjectiveTo investigate the expression of S100A8protein in transitional cell carcinoma of bladder（BTCC）and analyze its clinical significance.MethodsThe expression of S100A8protein in 68cases of BTCC and 10 cases of adjacent normal bladder tissues was detected by immunohistochemical staining and its correlations to clinic pathologic features was then analyzed.ResultsExpression of S100A8protein was higher in BTCC than in adjacent normal bladder tissues（55.9%versus 0%，P＜0.01）.S100A8protein expression rates were 78.9%and 46.9%in pT2－pT4BTCC and pTa-pT1BTCC（P＜0.05），while 29.2%and 70.5%in PUNLMP plus low-grade BTCC and highgrade BTCC（P＜0.01），respectively.There was no difference between recurrence and non-recurrence （72.7%versus47.8%，P＞0.05）.ConclusionThe expression of S100A8protein was higher in BTCC than in the adjacent normal tissues，which was associated with pathologic grade and Stage of BTCC.The expression level of S100A8protein was getting higher with the increase of tumor pathology grade and stage.We might speculate that S100A8protein was correlated with the currency and progression of BTCC.The detection of the expression of S100A8protein is in favor of prognostic evaluation of bladder cancer.

Bladder cancer；S100A8；Immunohistochemistry

R737.14

A

1007－4287（2012）02－0234－03

＊通讯作者

2010－11－13）