武俊明 陆继好

水飞蓟素(Silmyarin)是指从菊科药用植物水飞蓟种子的种皮中提取所得的一种黄酮木脂素类化合物。主要的活性成分有水飞蓟宾(Silybin)、异水飞蓟宾(Isosilybin)、水飞蓟亭(Silychristin)和水飞蓟宁(Silydianin)等四种同分异构体，水飞蓟用来治疗肝胆疾病已有2000多年的历史，被称为“天然的保肝药”，本文采用三已知对照品进行了杂质检查方法可行性的初步验证，采用杂质对照品进一步验证方法对已知杂质检测的可行性。并对杂质对照品进行了必要的结构确证资料。

一、仪器和试剂

BRUKER AV500型核磁共振仪

仪器：PU－1580液相色谱仪(日本Jasco公司)

UV－1575紫外检测器(日本Jasco公司)

N－2000双通道色谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所)。

样品来源：江苏中兴制药有限公司

样品批号：20110501 20110502 20110503

水飞蓟宾对照品批号：20070201含量：99.97%

二、已知杂质研究

1.三个已知杂质对照品核磁共振谱的确定

根据文献，水飞蓟宾有三种主要有关物质，分别为水飞蓟亭、水飞蓟宁、异水飞蓟宾(A+B)，实验结果表明，除去DMSO－d6溶剂峰(δ2.50，7重峰)、精制样品时所用溶剂峰(δ3.29)和杂质峰，三个物质的氢谱归属结合了水飞蓟宾的氢谱归属，各个物质H的归属结果三个物质归属结果和文献相一致，从上可以证明三个杂质分别为水飞蓟亭、水飞蓟宁和异水飞蓟宾(A+B)。

2.已知杂质检测的专属性试验

色 谱 柱：Shimpak CLC －ODS 15cm ×6.0mm，5um

流动相：甲醇∶水∶冰醋酸=41∶59∶5

检测波长：288nm

流量：1.0ml/min

进样量：20μl

柱温：30℃

分别精密称取异水飞蓟宾、水飞蓟宁、水飞蓟亭对照品适量，加甲醇超声使溶解，并稀释制成约40ug/ml的溶液，另取水飞蓟宾适量加甲醇超声使溶解，并稀释制成1mg/ml的供试液。……