占今舜，宋虎威，陈宇光，李丽立，张 彬*

（1.湖南农业大学动物科学技术学院，长沙 410128；2. 中国科学院亚热带农业生态研究所 动物生态营养与健康养殖联合实验室，农业生态工程重点实验室，长沙 410125）

随着分子生物学及基因工程的发展，利用自身基因在外源细胞中的克隆与表达也受世人关注。生物表达系统的出现满足了科学发展的要求，并渐渐成为处理工农生产以及医疗卫生等领域问题的重要手段之一[1]。近年来，蛋白表达系统已有原核表达系统、真核表达系统、哺乳动物表达系统和昆虫细胞表达系统等。不同的表达系统，其有不同的特点。如原核表达系统主要是大肠杆菌，其表达体系相对简单，目的蛋白无法经过修饰加工，对于有复杂二级结构的蛋白就不宜用此表达系统[2]；哺乳动物表达系统，技术研究不够成熟，外源基因在动物体内容易受到排斥，导致表达不稳定，表达代价相对其他表达系统高很多；昆虫细胞表达系统，缺陷主要是表达量不足，而且容易产生错误的糖基化修饰[3]；真核表达系统主要是酵母体系，其中对毕赤酵母（Pichia pastoris）的研究最为热门，该体系既有糖基化程度不高，对目的蛋白污染小，对生长环境要求不高，其培养基易配置，便于高密度发酵表达等特点，又具有强效的启动子，还可对复杂的外源蛋白的高级结构进行翻译后加工折叠和修饰过程，比如糖基化、蛋白折叠及生成二硫键等，是一种优秀的真核生物表达系统[4]。……