宋金平 李小宁

癌基因的激活和抑癌基因的失活在肿瘤的发生、发展中起重要作用。P16基因是1993年发现的抑癌基因[1]，属于细胞周期抑制因子，有负向调节细胞周期的作用，可与细胞周期蛋白D1(cyclind1)竞争结合细胞周期激酶4(CK4)，使细胞周期停滞于G1期。CyclinD1是细胞周期的正调节因子，也是一种原癌基因，CyclinD1蛋白过表达可以促使细胞增殖。胃癌是消化道常见的恶性肿瘤，P16和CyclinD1均与胃癌的发生关系密切[2]，而在老年人胃癌中P16和CyclinD1蛋白的表达仍不十分清楚，本实验用免疫组织化学方法检测胃癌组织中P16和CyclinD1蛋白的表达探讨其蛋白表达与老年人胃癌临床病理特征之间的关系。

1 资料与方法

1.1 资料收集 收集2004年1月至2010年12月间住院患者手术切除胃癌标本85例，均为老年患者即年龄60～84岁，中位年龄68.6岁、进展期胃癌;患者中男66例，女19例;术前均未行放、化疗。

1.2 组织芯片的构建 在显微镜下定位标记的肿瘤组织，自制成10～18组织阵列(每一标本取二块组织芯，其直径1.6 mm)蜡块(专利号200920350099.2)。正常组织取自手术残端(选取距肿瘤7 cm以上的胃组织)共30例。

1.3 免疫组织化学染色 采用EnVision法[3]，以套细胞淋巴瘤和宫颈癌组织作为CyclinD1和P16的阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。

1.4 统计学分析 所有数据均采用SPSS统计学软件进行统计学处理，阳性率之间的比较采用χ2检验，两变量之间的关系分析采用Spearman等级相关分析表示，检验标准以α=0.05为显著性检验水准，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

正常胃组织和胃癌组织中P16和CyclinD1的表达，免疫组织化学染色结果判断:P16和CyclinD1阳性呈棕黄色，均定位于细胞核。……