吴丽娟 邹建话 刘小月 郑 磊 王 前

吴丽娟1，2，邹建话1，刘小月1，郑 磊3，＊，王 前3，＊

1 广东省深圳市宝安区妇幼保健院检验科，深圳518133； 2南方医科大学检验系，广州510515； 3南方医科大学南方医院检验科，广州510515； ＊通讯作者

肺炎链球菌（Streptococcus Pneumonia，SP）是全球儿童社区获得性感染的首要病原菌，既可导致儿童脓胸、败血症、脑膜炎等侵袭性感染，也可导致中耳炎（SP占30%～60%）、肺炎（SP占30%～50%）等呼吸道感染。我国每年因SP相关性疾病导致儿童死亡人数列全球前10名［1］。SP细胞外的多糖荚膜是其致病的关键，同时也是疫苗作用的靶点，根据荚膜多糖的不同，已经鉴定出46个血清群，93个血清型。SP的血清型既与致病性、耐药性有关，也与荚膜置换、疫苗有效性有关，是相关研究的核心［2］。由丹麦国家血清研究院（Statens Serum Institut，SSI）提供的荚膜肿胀法和乳胶凝集法是传统方法检测SP血清型的金标准［3］，但其抗血清昂贵，不能自动化及批量检测。由于90多种血清型的荚膜多糖基因序列（cps）的公布，分子分型技术有望替代传统方法，更简单快捷地检测SP血清型［4］。本研究旨在建立一种简易的血清型多重PCR（mPCR）方法，检查几种常见重要SP血清型（4、6、9 V、14、18、19F、23F、19 A），通过检测相应已知血清型和未知血清型临床菌株并与测序结果比较，以初步探讨该方法的应用价值。

1 材料与方法

1.1 实验菌株

1.1.1 已知血清型SP菌株：4、6、9 V、14、18、19F、23F、19 A（北京大学人民医院惠赠）各1株，血清型由SSI荚膜肿胀法确定。

1.1.2 未知血清型SP菌株：分离自2009年1月～2011年12月深圳市某区妇幼医院儿科患儿不重复SP菌株126株［5］，其中16株来源于血液，其它来源于呼吸道，用苛氧菌菌种保存管（MAST，英国）－70℃保存。……