左文娜，胡俊兰，冯立春，刘卫卫，李 健，代保强

(1沧州市中心医院，河北沧州 061001;2河北医科大学第四附属医院)

近来研究发现，基质金属蛋白酶(MMPs)是一类能降解细胞外基质及血管基膜的重要蛋白酶类，具有促进肿瘤侵袭及血管形成的作用。RECK(reversion-inducing-cysteine-rich protein with Kazal motifs)基因可通过抑制多种MMPs的表达，抑制肿瘤的侵袭及转移。2008年12月～2010年1月，我们采用流式细胞术检测了41例喉癌患者癌组织中RECK和MMP-14的表达，探讨其在喉癌发生、发展中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 取41例喉癌组织(喉癌组)、28例癌旁组织(癌旁组，距肿瘤切缘大于0.5 cm)及15例非喉癌患者(对照组)的喉部正常黏膜组织。所有肿瘤组织均经病理学确诊为鳞状细胞癌，癌旁组织及喉部正常黏膜组织均经病理证实为炎症或正常黏膜。全部病例术前均未行放疗、化疗，临床资料完整。喉癌组男36例，女5例;年龄42～76岁，中位年龄62岁;吸烟量 ＞400(年 ×支/日)者20例，≤400(年×支/日)者21例;癌肿直径≤3 cm者24例，＞3 cm者17例;有淋巴结转移13例，无淋巴结转移28例;病理学分级:G1组15例，G2组20例，G3组6例;喉癌分型:声门上型21例，声门型15例，声门下型5例;临床分期采用国际抗癌协会(UICC)2001年公布的TNM分类分期标准，Ⅰ、Ⅱ期16例，Ⅲ、Ⅳ期25例。

1.2 检测方法

1.2.1 单细胞悬液制备 取组织0.5 g左右，剔除坏死组织、纤维、脂肪及结缔组织。将组织放在120目不锈钢网上，下置一平皿，将组织剪碎，用眼科镊子轻轻搓组织块，边搓边用生理盐水冲洗，自然沉淀，收集细胞悬液。将混悬液用300目尼龙网过滤，去除细胞团块，收集细胞悬液。1 000 r/min离心2 min，弃上清液;再次1 000 r/min离心2 min，弃上清液。加入1 mL PBS将细胞悬浮，记数并调整细胞浓度为1×106/mL。……