张 帆 杨可达

1.中南大学湘雅医院妇产科，湖南长沙 410008；2.中南大学湘雅医院皮肤科，湖南长沙 410008

宫颈癌是妇科临床上较为常见的恶性肿瘤之一，近年来临床发病率呈现上升及年轻化的趋势，由于该病患者病死率较高，严重威胁了广大女性的健康[1]。最新研究表明，埃兹蛋白（Ezrin）)是恶性肿瘤的发展、浸润和转移过程中的关键调节因子，其主要是通过调节黏附分子及信号传导等途径实现的[2]。本研究对Ezrin蛋白的表达与宫颈癌关系及其与人乳头瘤病毒（HPV）感染的相关性作进一步探讨，旨在为Ezrin蛋白的临床辅助作用奠定分子生物学基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2009年10月—2011年12月期间，我院妇科进行手术治疗的宫颈癌患者113例，年龄42～65岁之间，平均年龄（54.62±12.81）岁。依据宫颈细胞病理学诊断报告（TBS）分类系统，其中19例为不能明确意义的不典型鳞状上皮细胞（ASC－US）；14例为低度鳞状上皮内病变（LSIL），均经病理切片诊断为CINⅠ；49例为高度鳞状上皮内病变（HSIL），经病理切片诊断为CINⅡ～Ⅲ；以及31宫颈鳞状细胞癌（CSCC）患者，经病理切片确诊为鳞状细胞癌。

1.2 研究方法

1.2.1 样本的处理 采用宫颈刷收集患者的宫颈脱落细胞样本，用4%甲醛溶液固定48h后，常规石蜡包埋，连续切片，对Ezrin蛋白进行免疫组化SP法检测。剩余细胞进行消化处理：50 mmol/L Tris，pH8.0；1 mol/L EDTA，pH8.0；0.5% 吐 温－20，0.2μg/μL 蛋 白酶 K，ddH2O；55℃水浴 2～3 h后离心，浓缩至 20 μL后可作为DNA模板进行HPV16/18的检测。

1.2.2 免疫组织化学检测Ezrin蛋白 采用免疫组化SP法检测Ezrin蛋白的表达情况，具体步骤严格按照说明书进行。阳性对照采用已知阳性片，阴性对照采用PBS代替第一抗体。……