冯志强，韩 坚，谢智勇，廖琼峰，张 蕾

(1.广州中医药大学中药学院，广东广州 510006;2.中山大学药学院，广东 广州 510080)

黄芩(Radix Scutellariae)为唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根，主要活性成分为黄酮类化合物［1］。临床上药理作用广泛，在许多方剂中均有配伍使用，如《金匮要略》收载方剂248方，其中含黄芩有20余方［2］。血浆蛋白结合率是进行药动学研究的重要参数［3］，而关于黄芩黄酮类成分，目前仅有黄芩苷单体血浆蛋白结合率的报道文献［4-5］，对于总黄酮部位中多种黄酮类成分血浆蛋白结合率的研究尚未见报道。本文以黄芩苷(namely baicalin，BL)、汉黄芩苷(wogonoside，WL)、汉黄芩素(wogonin，W)、千层纸素A(oroxylin A，OA)作为检测指标，采用平衡透析法研究其在大鼠血浆中的药物蛋白结合率，为进一步研究黄芩及其复方的药动学提供基础参数。

1 仪器与材料

1.1 仪器 AnkeTDL-40B离心机(上海科学安瓶科学仪器制造厂);Precisa XS225A十万分之一分析天平;天美T2000P高效液相色谱仪(UV detector，上海天美科学仪器有限公司);透析袋(14 000 D，广州文睿科学仪器有限公司)。

1.2 试药 黄芩总黄酮(水提酸沉;各指标成分含量:黄芩苷50.05%，汉黄芩苷1.06%，汉黄芩素6.39%，千层纸素A 0.83%);黄芩苷、汉黄芩素(中国药品生物制品检定所，批号:110715-200212、1514-200202);汉黄芩苷(西安融升生物科技有限公司，批号:091126，含量＞98%);千层纸素 A、高丽槐素(自制，含量＞98%);色谱甲醇、乙腈(Merk公司);其余试剂为分析纯。

1.3 实验动物 SD大鼠，180～220 g，♀♂各半，广州中医药大学实验动物中心。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 Phenomenex Synergi C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈(A)-0.1% 甲酸水(B)，梯度洗脱:0～5 min(A:32% ～35%)，5～15 min(A:35% ～50%)，15 ～25 min，(A:50% ～50%);流速 1.0 ml·min-1;检测波长:275 nm;进样量:20 μl。

2.2 样品处理

2.2.1 透析内液 取空白血浆(或透析内液)200 μl，加入混合系列对照品溶液(或甲醇)600 μl，内标(400 mg·L-1)100 μl，涡旋 3 min，12 000 r·min-1离心 5 min，取上清液。……