余传勇，桂 韦，黄 琳，王 玉

(安徽医科大学第一附属医院神经内科，安徽合肥 230022)

在脑损伤、癫痫等多种中枢神经系统(CNS)疾病的病理生理过程中，星形胶质细胞激活并过度增生形成胶质瘢痕［1］。激活的星形胶质细胞一方面可以分泌和合成大量的细胞外基质(ECM)抑制神经轴突的生长［2］，另一方面胶质瘢痕形成机械性屏障阻碍轴索再生长，从而影响神经功能的修复［3］。此外，星形胶质细胞的增殖及胶质疤痕形成还是某些脑病，如癫痫的脑功能紊乱的病理基础［4－5］，因此对CNS胶质疤痕的深入研究具有重要意义。研究发现在脑血管疾病、癫痫等脑损伤疾病中，转化生长因子β1(TGF-β1)含量由正常生理情况下的微量表达转而明显增加［6］。本文作者 Wang 等［7］发现TGF-β1的下游转导因子Samd3基因敲除小鼠脑损伤后胶质疤痕形成明显被抑制，然而，目前尚无证据表明Samd3对胶质疤痕形成的影响系经由TGF-β1-Samd3信号转导来完成的，因为Smad3同样转导来自TGF-β家族中其它细胞因子的信号。本文通过SiRNA干扰技术，探讨TGF-β1-Smad3信号转导通路在星形胶质细胞增殖中的作用，以期从星形胶质细胞分裂增殖的角度研究CNS胶质疤痕形成的细胞内信号转导机制，为脑损伤后中枢神经系统胶质疤痕形成的干预治疗提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体购自Doka公司，胰酶和胎牛血清均购自Hyclone公司，多聚赖氨酸和Lipofectamine2000均为Sigma公司产品，DMEM培养基购自Gibco公司，5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)抗体购自Abcam公司。

1.2 方法

1.2.1 小鼠星形胶质细胞的培养与鉴定［8］取出生后3 d内的ICR小鼠(安徽省实验动物中心)，无菌条件下断头取出大脑皮质部分，投入HBSS中，仔细剔除中脑、嗅球、海马、脑膜及毛细血管等结构，进行星形胶质细胞的原代培养。……