张丽莉 李世俊 司玉玲 梁芳芳 庞 华王玫

白血病是来源于血液系统的恶性肿瘤，是一组造血细胞大量分化受阻的恶性、克隆性、增生性疾病。60%~80%的患者经联合治疗后病情可缓解，但大多数患者终因复发而死亡。目前研究认为白血病干细胞（LSC）是白血病耐药复发的根源[1]，也是治疗的难点。针对LSC免疫治疗的研究较多，过继免疫治疗是免疫治疗的一个重要手段，该法通过直接向肿瘤患者体内输注具有抗肿瘤活性的免疫活性细胞，使其在体内发挥抗肿瘤作用。细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）和树突细胞（DC）联合的免疫治疗越来越受到临床关注，DC-CIK共同培养可明显提高CIK的增殖活性和细胞毒作用[2]。本实验通过观察DC-CIK共培养对自身LSC的杀伤作用，以探索白血病免疫治疗的新方法。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取中国医学科学院血液病研究所2010年9月—2011年9月收治的慢性粒细胞白血病加速期（CML-AP）患者10例，其中男6例，女4例，年龄35~78岁，中位年龄51岁，慢性期病程0.5~7.5年。所有患者诊断均符合参考文献[3]的诊断标准。经细胞形态学、细胞遗传学或细胞分子学检测确诊，荧光原位杂交（FISH）技术检测BCR/ABL融合基因阳性。

1.2 主要试剂与仪器 （1）试剂：RPMI-1640培养基（赛默飞世尔生物化学制品有限公司），新生胎牛血清、淋巴细胞分离液（天津血液研究所试剂公司），别藻青蛋白（APC）-CD34、藻红蛋白（PE）-CD38、异硫氰酸荧光素（FITC）-CD44、FITC-CD40、APC-HLA-DR、PE-CD80、叶 绿 素 蛋 白（Per⁃cp）-cy5.5-CD56、PE-cy7-CD83、PE-CD8、FITC-CD3、FITCP-GP（美国BD Bioscience公司），LDH释放实验试剂盒（美国Promega公司），重组人血小板生成素（rhTPO）、重组人干细胞生长因子（rhSCF）、重组人FMS样酪氨酸……