李 平，叶 军，张立新，丁小平，陈静波，栾正云

(泰州市人民医院普外科，江苏 泰州 225300)

胆结石是一种常见病，可发生于胆囊、肝内胆管或胆总管。其发病因素与种族、遗传、地理、饮食等因素而不同[1-3]。细胞免疫功能在人体抗感染及内环境自身稳定中具有极其重要的作用。胆结石患者细胞免疫功能有显著性变化，其局部病理改变与外周血T细胞的变化有明显关系，我们对90例胆结石患者外周血T淋巴细胞亚群进行分析，以了解胆结石患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 非结石性胆囊炎23例、胆结石急性发作49例均来源于我院2011年6～12月门诊及住院患者。其中胆囊炎组男14例，女9例，平均(37.8±19.3)岁；胆结石急性组男28例，女21例，平均(32.5±11.7)岁。正常对照组31例、胆结石未发作41例均来源于我院体检中心。其中正常对照组男22例，女9例，平均(35.6±13.6)岁；胆结石未发作组男26例，女15例，平均(34.3±14.1)岁。

1.2 方法

1.2.1 仪器 FACSCalibur流式细胞仪 美国BD公司产品，用CELLQuest软件(BD公司)获取和分析实验数据。鞘液用Systmex公司的Cellpack血细胞稀释液。

1.2.2试剂 CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC(Cat No：340499t)由BD公司提供。

1.2.3 流式细胞仪标本处理 所有受试者均于当天抽取外周静脉血2 ml，EDTA-K2抗凝，标本在6 h之内测定。将试管加入CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD-APC 20 µl，将标本充分混匀，加50 µl标本，震荡器上充分混匀，避光放置15 min；加入溶血素2 ml，充分震荡，避光放置10 min。1 500 r/min离心5 min弃上清，加入生理盐水2 ml震荡，1 500 r/min离心5 min弃上清，加入生理盐水100µl，充分震荡混匀，待测。

1.2.4 流式细胞仪器设置及数据分析 用FACSComp调整仪器FSC、SSC、FL1、FL2、FL3、FL4的电压及补偿。用CELLQuest软件获取20 000个淋巴细胞，分析CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞占淋巴细胞的百分比。……