郭军红，孟华星，严 澎

氧化应激在急性缺血性脑损伤中发挥了重要的作用［1］。近年来有大量研究证实，重组人促红细胞生成素（rhEPO）在缺血性脑损伤中发挥了抗氧化作用［2］，但其作用机制仍不清楚。本研究采用大鼠永久性局灶性脑缺血（pMCAO）模型，通过对缺血脑组织中脑梗死体积、核因子E2相关性因子2（Nrf2）及血红素加氧酶（HO－1）表达的研究，探讨rhEPO在缺血性脑损伤的抗氧化作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 36只健康雄性SD大鼠（山西医科大学实验动物中心提供），体重230g～270g。

1.2 药品及试剂 重组人促红素注射液（北京四环生物制药有限公司），Nrf2、HO－1兔抗鼠多克隆抗体（北京博奥森生物技术有限公司，免疫组化用），PV－6001二步法免疫组化检测试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司），辣根过氧化物酶标记的二抗（北京中杉金桥生物技术有限公司）。

1.3 分组 随机将36只SD大鼠分为假手术组（n＝12）、缺血组（n＝12）和rhEPO治疗组（n＝12）。每组随机选取6只行免疫组化。

1.4 模型制作与取材

1.4.1 模型制作 采用改良的Zea－Longa法［3］制备pMCAO模型。大鼠在术前24h禁食，术前4h禁水，10%的水合氯醛（0.35mL／kg）腹腔注射麻醉后，仰卧位，取颈正中切口，暴露并钝性分离左侧颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）、颈内动脉（ICA）。结扎ECA远端、CCA近心端，用动脉夹夹住ICA，在CCA近分叉处约5mm处剪一“V”型小口，将预先准备好的直径约0.26mm的蘸有石蜡的尼龙线头轻轻插入CCA，从CCA分叉处计算，插入18mm～20mm时稍遇阻力即可停止，并结扎CCA，逐层缝合筋膜、皮肤，建立pMCAO模型。假手术组除插入鱼线约10mm外，其余操作与缺血组相同。rhEPO治疗组在缺血2h时腹腔注射rhEPO 5 000IU／kg，假手术组与缺血组则给予等量的生理盐水。……