马彩云，李远征，杜凤和

1986年 Murry等［1］首次提出了缺血预处理 （ischemic preconditioning，IPC）的概念：预先反复短暂缺血再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）可以提高心肌组织对随后较长时间缺血的耐受性。IPC是迄今为止对心肌保护作用最强的机体内源性保护机制。丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）家族在细胞分化、发育、存活及死亡等生理过程中发挥着重要的作用。细胞外信号调节的蛋白激酶（extracellular signal regulated protein kinases，ERK）是 MAPK家族重要成员之一。ERK转导通路不仅涉及心肌细胞的信号转导、生长等生理过程，而且与心肌细胞的肥厚和凋亡等病理过程密切相关。ERK在IPC中的变化及意义仍存在争议。本研究旨在观察IPC对大鼠缺血再灌注心律失常和心功能的影响以及ERK1／2在IPC中的作用，从而探讨缺血预处理的保护机制。

1 材料与方法

1.1 材料 健康雄性Wistar大鼠16只，体重150g～180g，由首都医科大学实验动物部提供；抗－磷酸化 MAPK（Thr202／Thy204）购自美国Promega公司；羊抗兔IgG抗体－辣根过氧化物酶标记购自北京中山公司；Western－Blotting发光试剂盒购自美国Santa Cruz。

1.2 方法 所有动物均为自由饮水、自由摄食。8周后，戊巴比妥钠（45mg／kg）腹腔注射麻醉。气管插管连接动物人工呼吸机。结扎和松开冠状动脉左前降支复制心肌I／R模型；采用缺血5min／再灌注5min两次造成IPC。用四导生理记录仪持续监测标准肢体导联（Ⅱ）导的心电图，并通过高速数据采集卡输入计算机。参考Cutis和Raringgervoa等［2，3］的标准对心律失常进行评分。0分：无心律失常或仅有室性早搏（＜5次）；1分：仅有室性早搏（≥5次）；2分：仅有一阵室性心动过速（＜60 s）；3分：一阵心动过速（≥60s）或多阵心动过速（累积＜60s）；4分：多阵心动过速（累积≥60s）；5分：出现室颤（非不可逆性）；……