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金胺O荧光染色在石蜡组织切片麻风病诊断中的应用

2012-07-05齐兴峰谢飞来朱育连郑智勇

齐兴峰 谢飞来 朱育连 郑智勇

(南京军区福州总医院病理科,福建 350025)

目前病理学诊断麻风病主要依靠HE染色形态特点和抗酸染色找到麻风杆菌作为确诊依据[1]。抗酸染色法作为经典的麻风杆菌检测方法,一直以来都被各级医院应用。瘤型麻风病变中麻风杆菌很容易被抗酸染色显示,但在结核型或未定型麻风病变中杆菌数量非常少,可能会出现阴性染色;或仅有极少量杆菌,需要镜检者花较长时间仔细寻找才能查到一根抗酸杆菌[2]。采用PCR检测麻风杆菌是目前比较先进的方法,但由于麻风病例数量少,一般医院都没有备有相应的检测试剂。

金胺O荧光染色原理与抗酸染色相似,临床上主要用于痰液或分泌物中结核杆菌的检测[3]。我们曾证实金胺O荧光染色可以用于石蜡切片检测结核杆菌以及非结核分支杆菌[4],且效果优于抗酸染色。本文将进一步观察金胺O荧光法用于石蜡切片中麻风杆菌的染色效果。

材料和方法

1 标本

选取我科存档的麻风病组织蜡块6例,其中瘤型麻风5例,未定型麻风1例;男性4例,女性2例,年龄34岁-72岁,中位年龄53岁。另取异物性肉芽肿6例作为阴性对照。每例组织连续石蜡切片4μm厚,分别做金胺O荧光染色和抗酸染色。

2 金胺O荧光染色

染色剂:金胺O粉剂0.1g溶于10ml 95%乙醇中,加5%石碳酸至100ml;脱色剂:3%盐酸-75%乙醇;复染剂:0.5%高锰酸钾水溶液。步骤:切片脱蜡至水,浸入预热的染色剂中63℃染色15-25min,水洗,脱色剂脱色2-5min至无黄色,水洗,复染剂复染30s-2min,水洗,无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片;……

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