张 杰 王 赟 陈小希

（1十堰市人民医院内分泌科 湖北442000；2中国人民解放军 95825部队医院 湖北 432111；3湖北省地质职工医院 武汉430072）

胰腺癌发病隐匿，恶性程度高，早期诊断困难，并且对各种辅助治疗敏感性不高［1］，生存率低，是预后差的恶性肿瘤之一［2］。胰腺癌发病率逐年上升，已成为胃肠道恶性肿瘤中继结、直肠癌后第4位致患者死亡的原因。因此，对胰腺癌侵袭、转移的研究，对于提高胰腺癌的诊断和治疗有极其重要的意义。

包含 WW 域的氧化还原酶（WW domain－containing oxidoreductase，WWOX）基因是一个跨越了染色体脆性位点FRA16D的抑癌基因，内、外源性多种因素造成FRA16D断裂，使WWOX基因发生基因组重排而失活，导致WWOX基因在多种肿瘤细胞中表达降低或缺失［3－4］。

本文通过应用免疫组织化学方法和图像分析技术检测胰腺癌及胰腺炎组织中WWOX蛋白的表达水平，探讨WWOX蛋白在胰腺癌发生、发展过程中的作用机制，为临床上治疗胰腺癌提供理论依据。

材料和方法

1.材料来源

人胰腺癌芯片4张由桂林泛谱生物技术有限公司构建，15×10点阵，每点直径1.1mm，4μm厚，其中包括70例胰腺癌组织和5例胰腺炎，双芯布阵。所有组织来自临床外科手术切除标本，经10%中性缓冲甲醛固定24h。

2.主要试剂

即用型鼠抗人WWOX单克隆抗体（购于北京中杉生物技术有限公司）；超敏即用型SP通用型免疫组织化学试剂盒（购于福州迈新公司）；DAB显色试剂盒及多聚赖氨酸（购于北京中杉生物技术有限公司）。

3.方法

3.1 常规脱水、透明、石蜡包埋、切片及HE染色

3.2 免疫组织化学SP法检测WWOX相关抗原 具体步骤：（1）4μm组织切片常规脱蜡入水；……