赵 琳 贾鲲鹏 史 娟 苗乃周＊ 王 璐

（1延安大学医学院人体解剖学教研室；2延安大学附属医院，陕西 716000；3第四军医大学人体解剖与组织胚胎学教研室，西安 710032）

增食欲素（orexin）是由下丘脑外侧区（later hypothalamus area，LHA）合成和分泌的具有神经兴奋作用的多肽，是1998年Sakurai等［1］在大鼠脑内发现的，它包括两个单体orexin－A和orexin－B，orexin－B为一线性多肽，而orexin－A具有二硫键环化多肽，具有更稳定的生化结构，在生物学重要性方面比orexin－B更重要。近年的研究表明orexin系统，尤其是orexin－A，具有广泛的生理作用，参与摄食、能量代谢、睡眠－觉醒等生理活动的调节［2］。实验结果显示脑室内注射orexin－A能明显增加实验大鼠的摄食行为，表明orexin－A与摄食密切相关。研究者常采用禁食来研究orexin的激活和变化规律，但禁食多长时间效果最好并无报道。因此本实验采用免疫组织化学染色和灰度测量方法，观察禁食不同时段大鼠下丘脑穹窿周区orexin－A的表达。

材料和方法

1.实验动物和分组

实验采用Sprague Dawley大鼠（由延安大学医学院实验动物中心提供）24只（雄性，体重150－180g），随即分为4组，每组6只。一组为正常对照组，开始禁食时即灌注固定。另外三组分别禁食24h，48h和72h，动物自由饮水，存活相应的时间段后灌注固定。

2.大鼠一般情况观察

包括毛色、皮肤颜色、活动情况和反应灵敏度等，禁食组大鼠分别于禁食开始及禁食结束时各称体重一次。

3.灌注和取材

各组大鼠戊巴比妥钠（80mg/kg）腹腔注射麻醉，迅速开胸暴露心脏，经升主动脉灌注100ml生理盐水，继以400ml含4%多聚甲醛的0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH 7.4）灌注固定，持续1h左右后，取脑，置入含30%蔗糖的PB中4℃过夜。……