葛成龙 徐 娜 方婷婷 田德英

（华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科，武汉 430030）

我国重型肝炎发病率高，抢救治疗难度大，预后极差。肠源性内毒素血症参与重型肝炎各种并发症的发生和发展，严重影响其预后。预防和控制内毒素血症的发生是成功治疗重型肝炎的关键。近年来研究发现，粒细胞集落刺激因子 （granulocyte col－onystimulating factor，G－CSF）除了促进中性粒细胞系造血细胞的增殖、分化和活化外，还具有免疫调节的作用［1］。这种免疫调节作用可能对各种原因所致的肝损伤具有保护作用［2］。为了寻求重型肝炎新的治疗措施，本研究旨在观察G－CSF对小鼠内毒素血症急性肝损伤的作用，并探讨其可能机制。

材料和方法

1.材料

1.1 主要试剂与药品

重组人粒细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte colonystimulating factor ，rhGCSF）（商品名：吉赛欣），华北制药金坦生物技术股份有限公司生产；内毒素（lipopolysaccharide，LPS）（E.coli 055 ：B5），美国sigma公司产品；小鼠TNF－a ELISA 试剂盒、IL－10ELISA 试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司。

1.2 动物

昆明（KM）小鼠，SPF级，均为雄性，18－22g，购自湖北省实验动物研究中心，动物许可证号：SCXK（鄂）2008－0005。

2.方法

2.1 动物模型制备与分组

KM 小鼠腹腔注射 LPS（E.coli 055 ：B5）10mg/kg（参照文献［3，4］）制备小鼠内毒素性急性肝损伤模型。

实验小鼠随机分为3组，每组12只，即①内毒素肝损伤模型组（模型组）；②rhG－CSF预防组（预防组）；③正常对照组（正常组）。模型组腹腔注射LPS（E.coli 055：B5）10mg/kg，预防组于造模前1小时皮下注射rhG－CSF500ug/kg（预实验选定），正常组腹腔注射等剂量的生理盐水。各组分别在注射LPS后6h、24h两个时间点随机抽取6只小鼠，进行观察检测。另外41只小鼠，模型组21只，预防组20只，模型组腹腔注射LPS 30mg/kg，预防组在腹腔注射LPS30mg/kg前1小时皮下注射rhGCSF500ug/kg，观察两组小鼠的存活率。……