食管鳞癌组织中CDC2、CLDN5蛋白表达及其临床病理意义的研究
2012-07-05李红伟柴大敏冯振中甘怀勇陶仪声
中国组织化学与细胞化学杂志 2012年6期
马 莉 李红伟 柴大敏 冯振中 甘怀勇 陶仪声*
(1蚌埠医学院第一附属医院病理科,蚌埠医学院病理学教研室;2蚌埠医学院第一附属医院放疗科 安徽 233003)
食管癌是由食管黏膜上皮或腺上皮发生的恶性肿瘤,在十大恶性肿瘤中居第四位,在我国主要是以鳞癌为主。临床进展迅速且转移率高,易复发,预后差。食管癌的发生是一个多基因变异累积的复杂过程,因此从分子水平研究食管癌的发生机制对食管癌的诊断和治疗都有重大的意义。细胞分裂周期2(CDC2)基因涉及细胞周期调控中一个较为重要的基因,该基因主要在G2-M期起重要作用。CLDN5是claudin家族的一个重要成员,是构成细胞间紧密连接的主要骨架蛋白。本研究通过检查食管鳞癌中CDC2和CLDN5的蛋白因表达情况,探讨它们与食管癌发生、发展的作用以及两者之间的关系。
材料和方法
1.一般材料
收集2007-2008年本教研室食管鳞状细胞癌存档标本(石蜡包埋)90例,其中男性69例,女性21例;年龄38-79岁,中位年龄59岁。其中高分化鳞癌24例,中分化45例,低分化21例;浸润至浅层(粘膜内至浅肌层)20例,深层(深肌层至外膜层)70例;局部和远处有淋巴结转移者38例,无转移者52例;同时重度不典型增生16例,并挑选癌灶边缘5.0cm以上远端切缘组织28例做正常对照。
2.主要试剂
CLDN5一抗(兔抗人)购自NeoMarkers公司。CDC2一抗(兔抗人)购自Santa crus公司。
3.实验方法
用免疫组化Elivision方法对90例食管癌组织,28例癌旁正常组织及16例重度不典型增生组织做CDC2、CLDN5染色。抗体滴度分别均为1∶100,具体操作参见试剂说明书,用PBS代替一抗做阴性对照,用乳腺癌和皮肤组织分别做阳性对照。……
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