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不同浓度亳菊水提物对秀丽隐杆线虫脂滴凝聚影响观察

2012-07-05屈长青宫雯珺常好才姬云涛

屈长青 宫雯珺 常好才 姬云涛*

(1抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心;2阜阳师范学院生命科学学院,安徽 阜阳 236041)

肥胖已经成为危害人类健康的一个重要的危险因素,给人类社会造成日益沉重的经济负担[1]。如何科学调控脂肪细胞的大小和脂滴凝聚也越来越引起人们的重视。亳菊主产于安徽亳州、涡阳一带,栽培历史悠久。菊花的抗氧化、抗菌抗病毒、抗心脑血管疾病、抗凝血以及对中枢神经系统的作用一直被人们所认可[2],但对脂肪代谢的影响尚不清楚。前期本实验室通过罗勒水提物处理线虫,建立了以油红O染色探究线虫体内脂质含量的方法[3],为探究亳菊对线虫消化道脂滴的影响,本实验同步化培养秀丽隐杆线虫,并用亳菊水提物干预、油红O染色、吸光度测定等手段,其观察结果报道如下。

材料和方法

1.秀丽隐杆线虫及食物

1.1 线虫

N2野生型秀丽隐杆线虫(C.elegans the Bristol strain N2)及大肠杆菌 OP50(Escherichia coli OP50),由中科院等离子体物理研究所吴李君研究员惠赠。

1.2 药品及试剂

种子培养基、NGM培养基和多种缓冲液的配制参 照 文 献[16]亳 菊 (Chrysanthemum morifolium Ramat,Boju),由抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心提供。

2.方法

2.1 亳菊水提物溶液

500 ml蒸馏水浸泡25g亳菊24h,100℃水浴45min,纱布过滤1次,滤纸过滤2次,制成生药含量为50mg/ml的亳菊水提物,置于4℃冰箱中备用。

2.2亳菊水提物培养基制作

将亳菊水提物加蒸馏水稀释,配制不同浓度的的亳菊水提物溶液(5mg/ml,10mg/ml,15mg/ml,18mg/ml,20mg/ml,22mg/ml,25mg/ml,30mg/ml,40mg/ml),并取代蒸馏水配制含不同浓度亳菊水提物的NGM培养基。

2.3 大肠杆菌的培养及线虫同步化、虫体油红O染色

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