Barrett食管组织 HIF-1α、mtP53、IMP3蛋白表达及意义
2012-06-29丁光荣张俊文
丁光荣,张俊文
(重庆医科大学附属第一医院消化内科 400016)
Barrett食管(Barrett′s esophagus,BE)是可能引发食管末端及胃食管交接处腺癌的高风险疾病之一[1],干细胞分化紊乱是其可能的发病机制,调控干细胞分化的各种转录因子和基因突变有可能是食管干细胞肠化生的重要分子基础。缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)是细胞应激缺氧时所产生的转录激活因子,突变型P53(mtP53)及Insulin-like growth factor-Ⅱ mRNA-binding protein 3(IMP3)与很多肿瘤的发生、发展相关。三者共同在Barrett食管形成过程中所起作用并少见报道,本文通过研究这3种蛋白在Barrett食管及反流性食管炎中的表达,探讨三者在Barrett食管发生、发展过程中的作用。现报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料 标本来自本院消化内镜中心2010年1月至2011年12月胃镜活检,经病理确诊为Barrett食管患者100例。其中男58例,女42例;年龄18~67岁,平均(51.55±11.83)岁。反流性食管炎组织取自同期胃镜标本,经病理证实为反流性食管炎的患者50例,其中男28例,女22例;年龄19~63岁,平均(46.90±13.11)岁,两组一般情况比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2主要试剂 HIF-1α、IMP3兔抗人单克隆抗体购自美国Epitomics公司,mtP53兔抗人单克隆抗体购自武汉三鹰公司,免疫组织化学SP试剂盒由北京康为世纪公司提供。
1.3检测方法 每一例标本均行4μm连续切片,分别进行HIF-1α、mtP53、IMP3免疫组织化学染色(均采用 SP法)和HE染色。用已知阳性片作阳性对照,以PBS代替一抗作阴性对照。HIF-1α多克隆抗体稀释度数为1∶200,mtP53、IMP3多克隆抗体稀释度数为1∶100。
1.4结果判定 HIF-1α、mtP53蛋白以细胞核呈棕黄色颗粒为阳性,IMP3蛋白以细胞质有棕黄色颗粒为阳性,对各组标本作免疫组织化学染色阳性评分,依照细胞阳性着色程度(抗原含量),阴性(-)着色为0分、淡黄色弱阳性(+)为1分、浅褐色中等阳性(++)为2分、深褐色强阳性(+++)为3分。……
