秦 宇，王子卫，杨宁波，查 郎，朱代亮

（重庆医科大学附属第一医院胃肠外科 400016）

胃癌发病率在男性恶性肿瘤中仅次于肺癌占第2位，我国胃癌发病率在居恶性肿瘤的第1位［1］。近年来虽然外科手术、放疗、化疗取得长足进步，然而进展期胃癌的5生存率却不到20%［2］。胃癌的免疫治疗及基因治疗等也伴随着分子生物学和基因工程技术的提高而逐渐成为新型的治疗方法［3］。国外报道表皮生长因子（EGFR）与胃癌的病理临床分期、浸润层次、淋巴转移及预后密切相关［3－5］。以往一直认为胃癌大多为腺癌，对放射线不敏感，故对胃癌很少用放疗。随着放疗设备的更新及放疗技术的改进，开展术前、术中、术后放疗能够提高疗效，放疗对胃癌有了新的应用前景。为此本文研究人EGFR显性负性突变体真核表达载体（pEGFPN1－dnEGFR）对胃癌细胞放疗敏感性的影响，寻求提高胃癌放疗敏感性的新方法，现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料 人胃癌细胞株SGC－7901和NCI－N87购自中国科学院，质粒pEGFP－N1购自美国Clontech公司，质粒pEGFPN1－dnEGFR前期试验已构建成功。胎牛血清（FBS）购自杭州四季青公司，MTT、DMSO购自Sigma公司。RNAiso Plus、PrimeScript RT、Premix Taq购自 TaKaRa公司；Bax抗体及Cyclin D1抗体购自碧云天公司。配胶试剂盒、蛋白定量试剂盒、ECL发光试剂盒购自碧云天，PVDF膜（Millipore，美国）。

1.2方法

1.2.1细胞培养 细胞用含10%FBS的RPMI 1640培养基于37℃，5%CO2恒温孵箱中培养，选用对数生长期细胞进行试验。将SGC－7901、NCI－87两种胃癌细胞分别分为3组：未处理组、pEGFP－N1空载体质粒转染组（空质粒组）、pEGFPN1－dnEGFR质粒转染组（目的质粒组）。

1.2.2放疗方法 采用60Co放疗机（GWGP－80，中国），6MV的X射线，在源皮距为100cm、射野20cm×20cm下对指数生长期的稳定细胞株室温下分别采用2、4、6、8、10Gy剂量照射，并设立未照射组。……