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硫链丝菌肽对人鼻咽癌HNE-1细胞生长及Foxm1表达的影响

2012-06-29陈鸿雁

重庆医学 2012年31期
关键词:检测

林 力,邓 碧,寿 铸,梁 佳,陈鸿雁△

(1.重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科 400016;2.重庆市渝北区人民医院麻醉科 401120)

硫链丝菌肽(thiostrepton,TST)是一种噻唑类抗生素,可从多株青链霉菌中分离获得[1]。最近,有研究发现TST可通过靶向作用于Forkhead box protein M1(Foxm1)转录因子抑制肿瘤细胞增殖,并且对其他转录因子的转录活性无影响;此外,用此类抗生素处理不同来源的人肿瘤细胞株,可在下调Foxml基因表达的同时诱导细胞凋亡[2]。

Foxm1是一种上调细胞增殖的转录因子,属叉头框家族(Fox家族)。有研究表明,它与胚胎发育、再生、衰老和肿瘤发生等许多病理生理过程密切相关[3]。本研究前期工作中发现Foxm1在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织中高表达,与NPC的分期及转移程度呈正相关。因此,本研究从细胞角度检测Foxm1在鼻咽癌HNE-1细胞株中的表达;同时检测TST对鼻咽癌HNE-1细胞株增殖抑制的作用及可能机制,现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1肿瘤细胞系 人鼻咽癌HNE-1细胞株(购自中科院上海细胞所)。

1.1.2试剂与药品 RPIM1640(Gibco公司),新生小牛血清(杭州四季青公司),四甲基偶氮唑盐(MTT,上海华舜生物工程有限公司),二甲亚砜(DMSO,重庆医药股份有限公司),TST(Merck公司),免疫组化SABC试剂盒、DAB显色试剂盒、山羊抗兔二抗(北京中杉公司),兔抗人Foxm1多克隆抗体(Santa Cruz公司),Western blot相关试剂(碧云天生物技术公司)。

1.2方法

1.2.1细胞培养 将HNE-1细胞接种到含10%热灭活小牛血清的RPMI1640培养液中,置37℃、5%CO2饱和湿度孵箱内培养,细胞呈单层黏壁生长。传代时用0.1%胰酶-0.02%EDTA溶液消化,台盼蓝拒染法计算成活细胞数。

1.2.2TST对HNE-1细胞体外抑制实验 取对数生长期的HNE-1细胞,胰酶消化,离心,制成细胞悬液,调整细胞数为5×104/mL。……

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