董宝花，赵嘉训

20%甘露醇注射液作为治疗脑水肿、降低颅内压的常用药在临床广泛应用，特别是在急救心肺脑复苏过程中的治疗中尤其重要。目前，关于甘露醇在心肺脑复苏中最佳给药时间上没有给予应有的关注，本课题利用郗东峰等[1]报道的小鼠脑缺血再灌注损伤模型，于再灌注后不同时间点采用甘露醇干预，观察其对小鼠脑海马CA1区细胞内环氧化酶－2（COX－2）表达情况的影响，从而为临床救治过程中心肺脑复苏提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 健康昆明小鼠36只，体重（35±5）g，雌雄随机，清洁级。本次实验随机分为6组，每组6只。假手术组分离双侧颈总动脉，穿线，但不结扎；缺血再灌注损伤组分离双侧颈总动脉，穿线结扎1 h后再灌注，但不给药；甘露醇即刻干预组、甘露醇30 min干预组、甘露醇1 h干预组、甘露醇1.5 h干预组分离双侧颈总动脉，结扎1 h后再灌注，分别在再灌注即刻、30 min、1 h和1.5 h尾静脉注射20%甘露醇1 g/kg。

1.2 主要药品及试剂 20%甘露醇注射液（石家庄四药有限公司，批准文号：国药准字 H13023007，批号：090217404），兔多抗COX－2多克隆抗体、生物素标记的山羊抗兔IgG、SABC、DAB显色试剂盒、5%BSA封闭液（武汉博士德公司）。

1.3 模型制备 采用郗东风等[1]报道的昆明小鼠双侧颈总动脉结扎脑缺血再灌注损伤模型，造模成功后分别用HE和COX－2免疫组化染色。

1.4 计算机图像分析 用数码成像仪在显微镜下采集图片，拍摄图像，所得图像采用BI2000医学图像分析系统进行图像半定量分析，在400倍光学显微镜下，取病灶周围5个不重复高倍镜视野，测定细胞中棕黄色和棕褐色阳性表达颗粒的平均光密度（OD）值，取其平均值作为结果，越高表示蛋白表达越强。……