梁 磊，陈来照，段虎斌，郝 强，成 睿

创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）的发病率已居全身各种创伤的首位，极大地影响患者的生命健康和生活质量，给患者家庭和社会造成了极大的负担[1]。由于神经元的再生能力极差，目前尚无理想的治疗方法。目前大量研究显示，移植骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）治疗各种脑损伤是一种潜力巨大的疗法[2]。然而，TBI发生时，脑血管在暴力作用下直接遭到破坏，继而出现的脑水肿又进一步加重脑缺血的程度。这样，在脑缺血环境下，单纯移植BMSCs能否获得满意疗效令人担忧。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在体内是促血管生成剂。联合移植BMSCs与外源性VEGF能否通过改善受损脑组织的微循环而提升疗效？这一疗法对脑组织中脑源性神经营养因子（brainderived neurotrophic factor，BDNF）等细胞因子的表达有何影响？本研究将就此做一初步探讨。

1 材料与方法

1.1 实验动物 清洁雄性2月龄SD大鼠2只，体重210 g，用于培养BMSCs；清洁雄性3月龄SD大鼠40只，体重220 g～250 g，用于建立TBI模型。均由山西医科大学实验动物中心提供。

1.2 主要试剂与仪器

1.2.1 试剂 DMEM培养基（Hyclon，北京）；无支原体胎牛血清（杭州四季青）；胰酶蛋白（Solarbio，北京）；一抗BDNF兔多克隆抗体（Epitomics，美国加利福尼亚）；即用型SABC免疫组化染色试剂盒（博士德，武汉）。

1.2.2 仪器 超低温冰箱（SANYO，日本）；高温蒸汽灭菌器（新诺，上海）；台式低温高速离心机（Minispin plus Eppendorf，德国）；超净工作台（博迅，上海）；CO2恒温培养箱（Thermo，美国）；倒置相差显微镜（Leica，德国）；台式牙科钻；自由落体垂直打击仪（太原钢铁集团加工）；微量注射器；大鼠脑立体定向仪（军事医学科学院加工）。

1.3 TBI模型的建造 将40只SD大鼠随机分为单独移植BMSCs组（BMSCs组）、单独应用VEGF组（VEGF组）、联合移植BMSCs与VEGF组（V＋B组）及对照组，每组10只。……