Caspase-3参与白花败酱草皂苷诱导Hela细胞凋亡
2012-06-28田黎明朱贵明任继秋田丽华
张 涛 田黎明 朱贵明 任继秋 张 宇 田丽华
(佳木斯大学基础医学院,黑龙江 佳木斯 154007)
白花败酱草是败酱科草本植物的根茎及带根全草,在中国的华东、华中、华南及西南各地均有分布,是一种常用植物药。白花败酱草具有清热利湿、解毒排脓、活血化瘀、清心安神、改善肝功能、抑菌和抗病毒等作用。关于黄花败酱体内抗肿瘤,体外诱导人乳腺癌(MCF-7)细胞凋亡的作用曾有报道〔1〕,但白花败酱草及其总皂苷在抗肿瘤方面的作用,较少报道〔2〕。
1 材料与方法
1.1 细胞株与主要试剂 人宫颈癌Hela细胞株由哈尔滨医科大学微生物教研室赠送;RPMI-1640干粉培养基(美国Gibco公司);新生牛血清(杭州四季青公司);AB8大孔吸附树脂购于天津南开大学化工厂。
1.2 方法
1.2.1 实验药材与处理 白花败酱草购于秦皇岛市民乐医药公司,由安国市昌达中药材饮片有限公司提供。
1.2.1.1 白花败酱草水提物的制备〔3〕白花败酱草粉碎后加适量水,浸泡3 h,煮沸提取60 min,收集药液,经旋转蒸发仪50℃减压回收得白花败酱草水提液,真空干燥箱55℃干燥,得败酱草水提物固体干粉。
1.2.1.2 白花败酱草总皂苷的制备 取干燥的白花败酱草4 kg,粉碎,按1∶10用70%食用酒精浸泡4 h,加热回流提取2次,合并滤液减压回收乙醇,得白花败酱草乙醇粗提物。此粗提物加入石油醚脱脂,用AB8大孔吸附树脂层析分离总皂苷。白花败酱草醇提物上层析柱后用蒸馏水洗脱至洗脱液中无糖为止(Molish反应阴性)。再分别用30%、50%和70%乙醇洗脱,收集洗脱液,至各洗脱液Liberman-Burchard反应阴性为止。洗脱液减压回收乙醇,真空干燥得淡黄色粗提物,终重量为25.2 g,白花败酱草总皂苷的提取率约为0.63%。……
