覃红斌 魏 蕾 张京伟 唐军民

(湖北民族学院医学院，湖北 恩施 445000)

神经细胞内tau蛋白过度磷酸化，并由此形成异常的神经纤维缠结(NFTs)是AD的一个特征性病理变化〔1〕。神经元内正常的tau蛋白何以被磷酸化，并形成NFTs的确切病因和机制尚不清。Niemann Pick type C(NPC)病人脑同时存在胆固醇代谢失衡和NFTs，提示胆固醇与tau蛋白过度磷酸化可能存在某种联系〔2〕。研究发现胆固醇在神经缠结变的神经元中聚集〔3〕，支持细胞内胆固醇过载与tau蛋白磷酸化有关。本研究基于上述背景，通过观察大鼠海马胆固醇含量升高后tau蛋白磷酸化程度的变化，探讨其在AD中可能的作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 雄性SD大鼠(同济医学院动物中心，清洁级)，体重200～250 g，2～3月龄，常规环境饲养，随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组9只。

1.2 行为学检测 选取40只大鼠进行1 w的Morris水迷宫训练，遴选出36只成绩相近的大鼠进行后续实验，训练每天1次，每次3个象限。脑立体定位注射72 h后再次进行1次水迷宫检测，检测1个象限。

1.3 脑立体定位注射 SD大鼠称重，以5%水合氯醛0.6 ml/100 g腹腔注射麻醉，固定大鼠于脑立体定位仪上，使前后囟保持水平，头顶局部剃毛，消毒。头顶正中矢状切口长约1.5 cm，用骨膜分离器完全分离骨膜，使前后囟暴露。以前囟为零点定标:前囟后3.8～4.5 mm，中线旁开2.0 mm，用台式牙科钻在双侧海马各钻1孔，用10μl微量注射推进器缓慢注射。对照组注射0.9%Nacl，低剂量组注射2μg/ml胆固醇，中剂量组注射8μg/ml胆固醇，高剂量组注射20μg/ml胆固醇，总剂量均为10μl/只。进针至硬膜下约3.0 mm，缓慢注入，注射完毕后留针10 min，再缓慢退针，以防药物沿针道返回。……