胰腺癌组织中XAF1基因启动子区甲基化状态及XAF1蛋白的表达
2012-06-20赵永福杨红星卢宾宾
赵永福,杨红星,唐 哲,卢宾宾
郑州大学第一附属医院肝胆外科郑州450052
X染色体连锁凋亡抑制因子(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)相关因子1(XIAP-associated factor-1,XAF1)是一个新发现的可以拮抗XIAP抗凋亡作用的蛋白,其在所有胚胎组织及成人正常组织中广泛表达,但在许多肿瘤组织和肿瘤细胞株中低表达甚至不表达,是一种潜在的肿瘤抑制因子[1-2]。XAF1位点的杂合性缺失及XAF1启动子区的CpG岛甲基化可能是其表达被抑制的机制[3-4]。作者采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylationspecific PCR,MSP)及免疫组化SP法观察胰腺癌、胰腺良性疾病及正常胰腺组织中XAF1基因启动子区甲基化状态及XAF1蛋白的表达,探讨XAF1在胰腺癌发生、发展中的作用及意义。
1 材料与方法
1.1 标本来源 收集郑州大学第一附属医院2008年1月至2011年1月手术切除的胰腺癌、胰腺良性疾病和正常胰腺标本,标本均经病理学证实。胰腺癌组48例,患者中男36例,女12例,年龄37~75岁,≤55岁13例,>55岁35例;肿瘤位于胰头35例,位于胰腺体尾部13例;肿瘤直径<3 cm 33例,≥3 cm 15例;组织学类型为高分化13例,中分化27例,低分化8例;按照2002年国际抗癌联盟(UICC)制定的TNM分期标准,Ⅰ期6例,Ⅱ期19例,Ⅲ期16例,Ⅳ期7例;有淋巴结转移19例,无淋巴结转移29例。胰腺良性疾病组26例,患者中男9例,女17例;胰岛素瘤20例,慢性胰腺炎6例。正常胰腺组15例,患者中男9例,女6例,其中外伤切除胰腺6例,十二指肠肿物切除获得的正常胰腺9例。所有患者术前均未给予放化疗。
1.2 胰腺组织中XAF1基因启动子区甲基化检测采用上海生工生物工程有限公司的UNIQ-10柱式动物基因组DNA抽提试剂盒提取组织DNA。采用EZ DNA Methylation-GoldTM试剂盒(ZYMO公司),按照说明书操作,对DNA进行亚硫酸盐修饰。……
