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人参皂苷Rg1对大鼠血管球囊损伤后原癌基因c-myc表达的影响①

2012-06-11黄燮南

遵义医科大学学报 2012年1期
关键词:模型

高 杨,邓 江,黄燮南

(遵义医学院药理学教研室暨贵州省基础药理重点实验室,贵州 遵义 563000)

人参皂苷Rg1(Rg1)为我国名贵中药材人参 (panax ginseng C.A.Mayer)干燥根的主要活性成分之一[8]。研究表明,在离体实验的条件下,Rg1可抑制肿瘤坏死因子-α所致血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖[1,2];我们的既往也发现,Rg1具有抑制球囊损伤所致大鼠颈动脉内膜增生[3]等作用。有学者认为,VSMC增殖需要原癌基因 c-myc转录的增加[4,5],但 Rg1 能否影响c-myc基因的转录还不清楚。本研究旨在利用球囊损伤所致颈动脉狭窄模型,探讨Rg1抗血管新生内膜增生作用与原癌基因c-myc表达的关系。

1 材料与方法

1.1 药品、试剂和仪器 主要药品、试剂、仪器及其来源如下:Rg1(纯度95%,北京天然药物研究院)、c-myc和β-actin引物(TaKaRa生物工程公司)、High-Capacity CDNA逆转录试剂盒(Applied Biosystems)、SYBR(r)GREEN PCR Master Mix(Warrington WA14SR.UK)、RNA 纯化试剂盒(上海华舜生物工程有限公司)、2F球囊导管(美国edwards lifescience公司)、Leica光学显微镜及照相系统(德国 Leica Microsystems Ltd)、实时荧光定量PCR仪(美国BIO-RAD公司)、RNA逆转录仪(德国Eppendorf公司)。

1.2 实验动物 清洁级雄性SD大鼠35只,体重325±25 g,由第三军医大学大坪医院实验动物中心提供(许可证号:SCXK-(军)2007-017)。

1.3 大鼠颈总动脉球囊损伤模型制备及动物分组动物禁食12 h,用20%水合氯醛0.2 ml/100 g腹腔注射麻醉后固定。切开颈部正中皮肤,分离左侧颈总动脉及颈外动脉,结扎颈外动脉远心端,将2F球囊导管从颈外动脉近心端插入至颈总动脉起始部。注入约0.1 ml生理盐水使球囊充盈,然后缓慢来回推拉球囊导管3次以剥脱颈动脉内皮,然后退出导管,结扎左颈外动脉,缝合切口。术后注射12万U/只苄星青霉素预防感染,清醒后置笼喂养。……

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