张喜华 蒋伟忠 官国先

直肠癌(rectal cancer)是消化道的常见肿瘤之一，直肠癌的发生、发展、侵袭和转移是一个复杂的多步骤的过程，尽管目前对于结直肠癌的治疗已经取得很大进步，但其侵袭和转移仍然是人类面临的一大难题。因此，深入研究直肠癌转移、复发的分子机制，具有重要的意义。MACC1(metastasis-associated in colon cancer-1)基因是2009年Stein等[1]新发现的一个人类结肠癌细胞转移调控基因，越来越多的研究表明，很多肿瘤的侵袭和转移与MACC1的过度表达密切相关[2]，MACC1在恶性肿瘤中的表达及其与肿瘤临床生物学行为和预后的关系渐渐受到人们的关注。本文采用免疫组化法检测直肠腺癌组织及正常癌旁黏膜上皮组织中MACC1蛋白的表达及其预后情况，以期寻找新的、特异性强、敏感性高的诊断复发与转移的标志物，为结直肠癌的诊断提供可靠的依据，并希望能为临床治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料 90例直肠癌标本蜡块选自福建医科大学附属协和医院2005年1月-2006年6月结直肠外科直肠癌手术切除的标本，30例正常对照选自距离直肠癌切缘大于5 cm的正常组织。标本中男53例，女37例，年龄28~84岁，平均60岁。手术标本一部分经甲醛固定，石蜡包埋后，切成4 μm厚，置入经多聚赖氨酸处理过的载玻片中，并常规HE染色，所有病例术前均未行放化疗。

1.2 试剂与方法 试剂用兔抗人MACC1单克隆抗体，购自美国Prosci公司，鼠抗兔二抗和DAB显色剂均购自福州迈新公司。采用免疫组化Maxvision法，石蜡切片脱蜡、水化，3%过氧化氢封闭内源性过氧化酶10 min后，将切片浸入枸橼酸缓冲液微波高压加热2 min，冷却后PBS洗涤3次，每次3 min，甩去多余液体，分别滴加一抗MACC1(1:200)37℃放置2 h，PBS 3次，每次3 min，甩去多余液体；……