杨士杰 姜达

他汀类药物是临床上治疗高胆固醇血症的主要药物。研究发现他汀类药物具有抗肿瘤作用。实验室研究显示他汀类药物可抑制多种肿瘤得增殖，如乳腺癌［1］、结肠癌［2］、胰腺癌［3］、白血病［4］、恶性胶质瘤［5］等。有关他汀类药物对肝癌作用的实验室研究，笔者尚未见国内报道。本实验就他汀类药物对肝癌细胞增殖作用影响做一初步研究。

1 材料与方法

1.1 实验材料 辛伐他汀为中国药品生物制品鉴定所产品，购自河北省药检所，用乙醇溶解NaOH激活［6］，HCl调节pH值至7.4备用。人肝癌细胞株SMMC-7721购自中国科学院上海细胞存储中心，p21Ras、NF-κB抗体为美国 Santa Cruz Biotechnology产品。

1.2 MTT实验检测SMMC-7721的增殖 取对数生长期的细胞接种于96孔板，待细胞贴壁后，用含辛伐他汀 0、5、10、20 μmol/L培养基作用 24、48、72 h。加入 MTT 继续培养 4～6 h，吸出培养液加入DMSO。于搏赛酶标仪波长570 nm处测定OD值，计算细胞的存活率。每个浓度设3个平行孔。

1.3 流式细胞术测定p21Ras、NF-κB 取对数生长期的细胞，接种于培养瓶，待细胞贴壁后，用含辛伐他汀 0、5、10、20 μmol/L培养基培养48 h。常规洗涤、消化、乙醇固定。取单细胞悬液加入鼠抗人单克隆抗体p21Ras、NF-κB，流式细胞仪检测。并下述公式计算。

1.4 统计学分析应用SPSS 10.0统计软件，计量资料以表示，采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 辛伐他汀对SMMC-7721细胞增殖的影响 MTT比色法分析显示辛伐他汀作用后细胞增殖被抑制，呈现剂量-时间依赖效应。因用乙醇溶解药物，乙醇对照对增殖无影响。见图1。

图1 辛伐他汀对肝癌细胞SMMC-7721抑瘤率

2.2 辛伐他汀对SMMC-7721肝癌细胞核转录因子NF-κB表达的影响 辛伐他汀作用SMMC-772148 h后，NF-κB的FI值分别为(1.00 ±0.02)、(0.95 ±0.01)、(0.86 ±0.02)、(0.74 ±0.02)。……