树莓组培快繁及工厂化育苗技术研究
2012-06-07杨艳敏袁兴福魏永祥王兴东
杨艳敏,袁兴福,魏永祥,王兴东,魏 鑫,王 莉,张 舵
(1.辽宁省果树科学研究所,辽宁熊岳 115009;2.辽宁省农业科学院,辽宁沈阳 1100161)
树莓为蔷薇科悬钩子属植物,果实富含多种维生素、SOD、花青素、鞣化酸等,具有特殊的保健和加工潜力,近年来国内外市场的需求日益增加,加快了树莓产业的发展,常规的繁殖方式已难以满足市场对苗木的需求,为此笔者进行树莓组织培养快繁技术的研究,并获得理想结果[1-4]。
1 材料与方法
1.1 无菌材料的获得
外植体处理:供试品种为托拉米、海尔特兹、秋红,将外植体叶片从叶柄基部切除,枝条剪成1.0~1.5 cm左右含单个腋芽或顶芽的茎段用流水冲洗2~3 h后,在超净工作台上用75%酒精荡洗30 s,再用0.1%的氯化汞溶液浸泡5~8 min,并不断搅动,倒去氯化汞溶液后用无菌水冲洗3~5次,经用无菌滤纸吸去材料上的附着水,将芽上下两端多余的茎段剪掉,留0.5 cm左右茎段,芽朝上接种到诱导培养基上。每瓶接种5个外植体,每处理接种10瓶,3 次重复[5]。
1.2 诱导培养基
设3个处理:
A1:MS+BA 0.5 mg/L+GA30.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L;A2:MS+BA 0.8 mg/L+GA30.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L;A3:MS+BA 1.0 mg/L+GA30.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L。
1.3 继代增殖培养基
继代增殖培养基设5个处理:当试管苗长至2~4 cm时进行下一次的继代。每次继代时,将试管苗的茎条剪成单个芽的茎段,3个茎段为一丛,每瓶4~6丛接入培养基上。
B1:MS+BA 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L;B2:MS+BA 0.3 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L;B3:MS+BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L;B4:MS+BA 0.6 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L;B5:MS+BA 0.8 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L。
1.4 试管苗瓶内及瓶外生根培养
生根培养基设6个处理:以1/2 MS为基本培养基,IBA 浓度分别为:0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/L。将长够生根标准的试管苗,剪成2~3个芽一个单苗,去掉叶片或保留顶叶接种到生根培养基上,每个处理接种10瓶,每瓶接种10个单株,重复3次。
试管苗瓶外生根。供试材料为在壮苗培养基培养21 d后的托拉米、海尔特兹、秋红组培苗;……
