陈秀丽 邓 兵

1.同济大学医学院，上海 200092；2.浙江省宁波市南门街道社区卫生服务中心，浙江宁波 315010；3.上海中医药大学附属龙华医院心内科，上海 200032

CXC趋化因子配体16（CXC-chemokine ligand 16，CXCL16）是近年在人的动脉硬化损伤部位的巨噬细胞中发现的一种趋化因子，既是一种膜结合蛋白，又具有清道夫受体作用和炎症属性[1]。趋化因子及其受体在动脉粥样硬化发生、斑块形成过程中的重要作用已被大家逐步认识到，但目前的研究大部分集中在动物实验中，冠状动脉粥样硬化与CXCL16关系的临床研究目前国内外报道较少。本研究旨在了解血清CXCL16水平与冠状动脉粥样硬化程度的相关性，利用酶标法检测血清CXCL16水平，比较正常人与不同类型冠心病患者血清CXCL16水平差异。根据冠脉造影检查结果，分析血清CXCL16水平与冠状动脉粥样硬化程度的相关性，讨论血清CXCL16对冠状动脉粥样硬化预测作用和作为冠心病危险分层的指标的可行性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2011年4月～2012年3月同济大学附属同济医院和上海市龙华医院心血管内科病房行冠状动脉造影（CAG）的患者。连续入选233例。所有研究对象入院后详细采集病史，行常规实验室和器械检查，记录吸烟、糖尿病、高血压史。根据病史、体检和检查资料，将233例研究对象根据临床诊断分为三组，急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）（ACS组）163例，其中不稳定性心绞痛（unstable angina pectoris，UAP）56 例，急性心梗（acute myocardial infaction，AMI）107 例；稳定性心绞痛（stable angina pectoris，SAP）（SAP 组）36例，经冠状动脉造影排除冠心病且无其他疾病的正常对照组34例。所有研究对象根据主诉，病史，体检及心脏超声等检查，排除先天性心脏病、合并心肌炎、严重心功能不全、严重肝肾疾病、自身免疫性疾病、血液病、炎症感染、血栓栓塞性疾病、近期（至少1个月）有手术、外伤史、严重的全身其他系统疾病的患者。三组研究对象在年龄、高血压史和糖尿病史方面差异无统计学意义（P＞0.05）。ACS组吸烟构成比明显高于SAP组和正常对照组。三组研究对象血脂成分中总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）差异均无统计学意义（P＞0.05）。SAP组高密度脂蛋白胆固醇（HDL）明显高于ACS组。各组基本资料见表1。

表1 三组一般临床资料分布情况（x±s）

1.2 方法

双抗体夹心酶标法检测血清CXCL16水平，并收集患者血脂和超敏C-反应蛋白 （high sensitivity C-reactive protein，hCRP）等指标。根据冠状动脉造影评价冠脉狭窄程度，进行Gensini评分，分析冠状动脉造影患者CXCL16与冠脉病变程度的相关性。人CXC趋化因子配体16酶联免疫吸附测定试剂盒（Human CXCL16 ELISA Kit）购自美国 R＆D公司，按试剂盒说明书要求操作。

1.3 统计学方法

应用PASW 18.0版统计软件计算和处理数据，先进行正态分布及方差齐性检验，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用独立样本的t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD法。计数资料采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 急性冠脉综合征组与稳定性心绞痛组及正常对照组CXCL16和hCRP水平比较

ACS组和SAP组血清CXCL16和hCRP水平显著高于正常对照组（P＜0.01）；ACS组血清CXCL16水平和hCRP水平显著高于SAP组（P＜0.01）。见表2、图1。

表2 急性冠脉综合征组与慢性稳定性心绞痛组及正常对照组CXCL16水平比较（x±s）

图1 急性冠脉综合征组与稳定性心绞痛组及正常对照组CXCL16水平比较

2.2 血清CXCL16和hCRP水平与冠状动脉病变支数的关系

按冠脉造影结果将冠脉病变分为单支、二支及三支病变，以此分为三组，利用单因素方差分析进行比较。随病变支数增加，CXCL16水平增加。组间两两比较，单支病变组与三支病变组（P=0）、二支病变组与三支病变组（P=0.002），差异有统计学意义，单支病变组与二支病变组之间差异无统计学意义 （P=0.319）。血清hCRP水平与病变支数无关 （P=0.153）。 见表 3、图 2。

表3 血清CXCL16水平与冠状动脉病变支数的关系

图2 血清CXCL16水平与冠状动脉病变支数的关系

2.3 血清CXCL16水平与Gensini积分的关系

根据CAG结果对冠脉病变程度计算Gensini积分，按照Gensini积分≤30分，31～60分，≥61分，将冠脉照影患者分为三组，随Gensini积分增加，CXCL16和hCRP水平逐渐升高，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。CXCL16两两比较亦有差异（Gensini积分≤30分组vs Gensini积分31～60分组，P=0；Gensini积分≤30分组vs Gensini积分≥61分组，P=0，Gensini积分 31～60 分组 vs Gensini积分≥61 分组，P=0.018）。hCRP两两比较有差异 （Gensini积分≤30分组 vs Gensini积分 31～60 分组，P=0；Gensini积分≤30 分组 vs Gensini积分≥61分组 P=0；Gensini积分 31～60分组 vs Gensini积分≥61分组，P=0.011）。见表 4。

表4 血清CXCL16水平与Gensini积分的关系

3 讨论

过去认为ACS是由于冠状动脉粥样硬化进行性发展造成管腔严重狭窄所致，但后来研究发现ACS的发生与冠状动脉狭窄程度无关，而与斑块稳定性和继发血栓形成密切相关[2]。有研究发现CXCL16能够刺激冠状动脉内膜的新生血管的形成。新生血管近端有炎症细胞的渗出和黏附分子的表达，新生血管既可能是炎症细胞渗入病灶的通路，又可能刺激新生血管的生成，并由此激发正反馈机制，促进斑块的发生、发展，乃至诱发斑块破裂出血，导致ACS的发生[3]。Lehrke等[4]比较不同类型冠心病和正常人CXCL16水平，结果显示CXCL16在急性冠状动脉综合征和稳定冠心病较正常人增高，在急性冠状动脉综合征组增高显著，提示血浆可溶性CXCL16与冠心病，特别是急性冠状动脉综合征相关，是急性冠状动脉综合征有力的独立预测因子。国内研究报道[5]也支持血浆可溶性CXCL16与冠心病，特别是急性冠状动脉综合征相关。

本研究中，冠心病患者的血清CXCL16水平显著高于正常对照组；ACS组血清CXCL16水平显著高于稳定性心绞痛组（P＜0.01），提示CXCL16与动脉粥样硬化有关，并随着冠心病病情的加重而进一步升高。与国内外研究[6-7]结论相似，进一步证明了血清CXCL16水平在一定程度上提示冠脉粥样斑块炎症反应和稳定性，可以作为ACS有力的独立预测因子。按冠脉造影结果将冠脉病变分为单支、二支及三支病变，以此分为三组，发现随病变支数增加，CXCL16水平增加，单支病变组与三支病变组（P=0）、二支病变组与三支病变组（P=0.002）有差异，单支病变组与二支病变组无差异。血清CXCL16水平与冠状动脉病变支数的关系也反应了血清CXCL16水平与冠状动脉病变程度的关系，但作为危险分层的指标尚需要进一步大型临床试验和研究。本研究发现随 Gensini积分，CXCL16水平逐渐升高，且 CXCL16在Gensini积分≤30分、31～60分、≥61分三组间两两比较时亦有差异。Yi等[7]对88例SAP、ACS患者及正常人进行冠脉造影检查发现，ACS患者血清CXCL-16水平明显高于SAP组及对照组（P＜0.01），与Gensini评分呈正相关。ACS患者血清CXCL-16水平与与Gensini评分呈正相关，说明CXCL-16水平越高，患者冠状动脉狭窄程度越严重。李定良等[8]对61例冠心病患者CXCL16与冠状动脉狭窄的另一衡量指标GRACE积分的相关性研究表明：在ACS组中，CX CL16与GRACE危险评分呈正相关，同样说明CXCL16与冠脉狭窄程度相关。因此，检测ACS患者的CXCL16对ACS患者的危险分层及治疗策略的选择具有一定的临床指导意义。

hCRP是与AS关系最密切的炎症标志物之一。Ki等[9]体外实验研究发现：将重组人CRP与THP-1单核细胞共同孵育后，可上调单核细胞中CC趋化因子受体2（CCR2）的表达，促进由单核细胞趋化因子-1（MCP-1）介导的对单核细胞的趋化作用。王克迪等[5]CXCL16基因多态性与C反应蛋白的相关性研究发现，CXCL16基因A181V多态性与血清hCRP水平独立相关。本研究中血清hCRP水平在急性冠脉综合征组与稳定性心绞痛组及正常对照组比较、与Gensini积分的关系，都与血清CXCL16水平表现出一致性，而血清hCRP水平与病变支数无关，由此可能说明虽然CXCL16与hCRP呈有关，但hCRP不能完全取代CXCL16作为冠状动脉粥样硬化特别是ACS的独立预测作用。CXCL16是独立于hCRP及血脂水平的生物标志物，较hCRP对冠心病危险分层有更大的价值。CXCL16与hCRP在ACS的发生、发展中作用机制不同，联合检测该二项指标可能有助于更好地预测和诊断ACS。

但也有研究发现矛盾结果，CXCL16可以剂量依赖的方式刺激血管细胞增殖[3]。抑制其增殖可以减少斑块中胶原骨架结构，使内皮下组织在血流中暴露增多，从而降低斑块稳定性，成为“易损斑块”[10]。由此说明，CXCL16有阻止“易损斑块”形成的作用。免疫组化研究也发现，在LDL受体缺陷的小鼠，尽管巨噬细胞积聚氧化LDL的能力有所减低，但CXCL16基因缺陷并没有减轻动脉粥样硬化，反而伴有动脉粥样硬化的加重，这也说明CXCL16可能具有保护性作用[11]。

目前多数研究支持CXCL16可作为ACS的独立预测因子，因此检测ACS患者的CXCL16对ACS患者的危险分层具有一定的临床指导意义，能否成为冠心病早期诊断和疗效监测的指标有待更多的临床研究。

[1]Ridker PM.High-sensitivity C-reactive protein and cardiovascular risk：rationale for screening and primary prevention [J].Am J Cardiol，2003，92（4）：17-22.

[2]陈旺军.急性冠脉综合征血清sCXCL16、hs-CRP水平变化及辛伐他汀的干预作用[J].浙江临床医学，2010，12（10）：1077-1078.

[3]Zhuge X，Murayama T，Arai H，et al.CXCL16 is a novel angiogenic factor for human umbilical vein endothelial cells[J].Biochem Biophys Res Commun，2005，331（4）：1295-1300.

[4]Lehrke M，Millington SC，Lefterova M，et al.CXCL16 is a marker of inflammation，atherosclerosis，and acute coronary syndromes in humans[J].JAm Coll Cardiol，2007，49：442-449.

[5]王克迪，刘志忠，王瑞珉，等.CXCL16基因多态性与C反应蛋白的相关性研究[J].检验医学，2011，26（1）：1-3.

[6]陈阳.不同冠心病血清soL-CXCL16，soL-ICAM1及hsCRP水平研究[J].实用临床医药杂志，2011，15（5）：30-32.

[7]Yi GW，Zeng T.Circulating CXCL16 is related to the severity of coronary artery stenosis [J].Archives of Medical Research，2008，39 （5）：531-535.

[8]李定良，巫相宏.急性冠脉综合征患者趋化因子CXCL1 6与GRACE积分的相关性及临床意义[J].当代医学，2011，17（3）：19-21.

[9]Ki HH，Kyung H，Jae HP，et al.C-Reactive protein promotes monocyte chemoattractant protein-1-mediated chemotaxis through upregulating CC chemokine receptor 2 expression in human monocytes [J].Circulation，2004，109（21）：2566-2571.

[10]Stoneman VE，Bennett MR.Role of apoptosis in atherosclerosis and its therapeutic implications[J].Clin Sci，2004，107（4）：343-354.

[11]Aslanian AM，Charo IF.Targeted disruption of the scavenger receptor and chemokine CXCL16 accelerates atherosclerosis [J].Circulation，2006，114（6）：583-590.