HPLC法测定芪黄颗粒剂中大黄素含量研究

2012-06-02束晓玉

中国现代药物应用 2012年11期

束晓玉

芪黄颗粒剂为黄芪和大黄等中药精制而成，可清热祛邪、扶正固本、调节免疫，临床上常用于治疗系统性红斑狼疮等病，多年的临床结果显示其疗效确切［1-2］。本文采用HPLC法测定芪黄颗粒剂中大黄素含量。

1 仪器与试剂

Waters高效液相色谱仪(美国，2487型紫外检测器，1525型输液泵，717自动进样器，2996型检测器，waterts Empower色谱软件)，电子天平(SartorisBS110S十万分之一天平)。芪黄颗粒剂为本院制备，大黄素对照品购自中国药品生物制品检定所，水为重蒸水，甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯。

2 方法

2.1色谱条件色谱柱为ZORBAX SB C18(规格:4.6 mm×250 mm，5μm)，流动相为甲醇-水(11∶1)，流速每分钟 1.0 ml，柱温室温，检测波长为 290 nm，进样量取 10 μl。

2.2供试品溶液的制备称取10.0 g芪黄颗粒剂，研细，过2号筛，混匀，精密称10.7400 g。浸泡于100 ml甲醇中过夜，过滤。吸取20 ml滤液，在水浴上将甲醇挥去，加20 ml重蒸水溶解，加入4 ml盐酸，然后在沸水上进行酸化30 min，室温冷却后再用氯仿萃取四次(30、20、20、20 ml)最终合并氯仿液。在水浴上挥干氯仿，用甲醇溶解残渣，然后在10 ml容量瓶中定容，即得。

2.3对照品溶液的制备精密称取大黄素对照品3.42 mg至25 ml容量瓶中，加入甲醇溶解至刻度，即得对照品贮备液。精密适量地吸取对照品贮备液，加入甲醇制成含大黄素为0.0820 mg/ml对照品溶液。

2.4重复性试验精密取同一批次样品，批号为20110428，按“2.2”项下方法制备供试品溶液6份，并根据上述的色谱条件进样，测得供试品中芦荟大黄素的相对标准偏差RSD=1.0%，说明本法的重复性较好。

2.5精密度试验精密吸取上述0.0082 mg/ml大黄素对照品溶液10L，连续依法进样5次，测得RSD=0.37%，λ=74985.2，说明本仪器具有良好的精密度。

表1 大黄素含量的检测结果

2.6稳定性试验吸取供试品溶液后，立即进行色谱分析，每隔一定的时间进样一次，测定峰面积的积分1 d，测得相对标准偏差RSI=1.0%，说明大黄素在室温1 d内的稳定性佳。

2.7加样回收率试验精密称取芪黄冲剂4份，分别在3份中加入0.8、1.2、1.6 ml对照品溶液，按“2.2”项下制备回收率试验溶液。获取1个样品液与3个不同浓度的加样样品液，分别吸取10μL进样，依法测定。得相对标准偏差RSD=1.11%，平均回收率为96.59%(n=3)。说明该方法具有较好的准确性。

2.8样品测定称取本品10 g，研细，过2号筛，混匀，精密称取2.0 g，按“2.2”项下制备供试品溶液，精密吸取10μL供试品溶液，并根据上述的色谱条件下测定。测得结果见表1，采用统计学t检验，3个平均含量比较，差异均无统计学意义(P ＞0.05)。