郭丽，祁荣，吴鹏

(沈阳医学院科学实验中心，辽宁 沈阳 110034)

目前，免疫组化染色技术已成为病理学诊断的重要手段。几年来抗原修复广泛应用于免疫组化检测，抗原修复使抗原决定簇充分暴露是免疫组化染色成功的关键。在热修复法中，压力锅加热法又较微波炉加热法更有效，酶消化法修复的抗原免疫组化的染色效果不如热修复法[1]。有少数抗原酶消化后染色的结果优于热修复法[2]。电炉煮沸抗原修复法也被许多人所采用。为了选择适宜的抗原修复法，我们先后采用压力锅抗原修复、电炉煮沸抗原修复、复合酶抗原修复法，对五种抗体的免疫组化染色结果进行筛选，选择最适宜的抗原修复法，以获得最佳的免疫组化的阳性结果。

1 材料与方法

1.1 实验动物与染毒 Wistar大鼠120只(沈阳药科大学实验动物中心提供)体质量230～250 g，按雌∶雄为2∶1于每晚6时合笼，次晨7～9时阴道涂片检查精子，查到精子定为妊娠0 d。实验组从妊娠6 d开始染毒，将NaAsO2溶于蒸馏水中，孕鼠自由饮用，饮水中的砷染毒剂量分别为10、50、100 mg/L，仔鼠出生后，母鼠继续饮含砷水，在仔鼠生后的0、28、42 d分批断头处死仔鼠，取大脑，用10%甲醛溶液固定[3]。

1.2 方法 染毒(蒸馏水配制的NaAsO2自由饮水染毒)剂量为10、50、100 mg/L，为实验组。阴性(自由饮用蒸馏水)对照组。胎鼠出生后，第0天、第28天、第40天分别处死，取大脑，用10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，组织切片5 μm，暴露大脑皮质及海马。选用鼠抗人单克隆抗体，NMDAR2A、NMDAR2B、NMDAR1、CHAT、ACTH及即用型SABC免疫组化试剂盒，均购自武汉博士德生物工程有限公司。……