张建群

（河北省巨鹿县医院外科，河北巨鹿 055250）

EAS混合溶剂体外溶石的研究

张建群

（河北省巨鹿县医院外科，河北巨鹿 055250）

目的探讨纯乙基叔丁醚，氨羧混合液以及5%氨氧化钠（EAS）混合溶剂分别对人胆道结石的直接溶解作用。方法通过体外对比试验表明，EAS混合溶剂对常见类型的各种胆道结石有很强的快速溶解作用。结果0.2g左右的结石在4h内体外溶石率可达90%～100%。结论该溶剂有可能成为一种实用的胆石快速接触性溶剂。

胆结石；溶剂；体外研究

本研究以寻求适合溶解各种结石的溶石剂为目的，经对比实验选择了乙基叔丁醚（E）、氨羧混合溶剂（A）、5%氢氧化钠（S）混合溶石剂，EAS混合溶剂对各类结石均有较强的溶解性，有可能成为一种实用的胆道结石快速直接溶石剂［1-2］。

1 资料与方法

1.1 材料：结石取自手术患者。根据结石成分分析，选择固醇型（固醇含量＞60%），色素型（胆红素及其盐含量＞60%），混合型（固醇及色素含量各占50%）。乙基叔丁醚（ethyl tertbutyl ether，ETBE）M=102.17，n2D0=1.374 6 bp=74℃。中药鸡内金汁

10mL（取新鲜鸡内金汁50mg，清洗干净，50℃水浸泡4h，压榨取汁包装，蒸汽灭菌器消毒10min备用）。氨羧混合溶液，分别将氨羧化合物乙二胺四乙酸二钠（ethylene diamine teraacetic acid，EDTA）、乙 二 醇 乙 醚 二 胺 四 乙 酸［ ethylene bis（oxgethyleneitriol）acid，EGTA］、氨三乙酸（NTA）与吐温-80、二甲基亚砜等按一定比例混合，用蒸馏水配成水溶液即可。5%氢氧化钠（NaOH）溶液，按质量百分比配成水溶液。

1.2 EAS混合溶剂的配制：利用正交设计法（4h）以溶石率为优化指标，选择混合溶剂中各组的最佳配比。

1.3 体外溶石实验：将直径相似，质量相似（0.2g左右）的各种结石，分别置入50mL梨形瓶中，加入等量的溶石剂，装上球形冷凝管，置入水浴箱中，35℃恒温，间断式振荡，保持4h将梨形瓶中的溶解物过滤，滤渣自然干燥称质量，计算溶石率。

2 结 果

2.1 ETBE的溶石效果：用ETBE分别对固醇型、色素型、混合型结石进行溶石研究，实验结果表明，固醇型结石4h溶石率达90% ～100%，混合型Ⅰ60%～70%，混合型Ⅱ30%～40%，色素型20%～30%；混合型Ⅰ中固醇含量大于混合型Ⅱ，混合型Ⅱ色素含量高。

2.2 氨羧混合溶液的溶石效果：用EDTA氨羧混合液对各类结石进行溶解，结果表明，固醇型4h溶石率5% ～10%，混合型Ⅰ 20% ～30%，混合型Ⅱ0%～60%，色素型80%～90%。

2.3 EAS混合溶剂最佳比例选择：根据2.1，2.2的实验结果，将一定量的ETBE、氨羧混合液、5%氢氧化钠溶液组成的混合溶剂进行溶石研究，由于影响溶石的因素较多，采用L9（33）正交实验法，固定反应温度35℃，反应时间4h，样品用量0.2g左右（直径相近），改变混合溶液中3种组分的用量，以溶石率为优化指标。表观好条件为a3、b1、c3，其溶石率最高为92.5%，由K值最大分析的好条件为a2、b1、c3，正交表中无此条件，为此对其做对比试验，结果后者溶石率为79.79% 。故确定最佳条件为 a3（2ml 5%NaOH）、b1（1ml EDTA混合溶液）、c3（4ml ETBE），见表1。

表1 L9（33）正交实验结果

2.4 EAS混合溶剂的溶石效果比较：利用上述实验得到的最佳溶石条件，对不同氨羧混合液进行了对比实验，各种氨羧化合物组成的EAS混合溶剂对各类结石的溶石效率大小顺序为EGTA＞EDTA＞NTA。这与氨羧配位剂与钙形成络合物的平衡常数的大小顺序是完全一致的。见表2。

表2 ETBE与不同氨羧混合溶液组成的溶石剂及溶石效果

3 讨 论

胆道结石的溶石研究是近些年深受关注的课题，但长期以来未取得满意的效果，直到20世纪70年代初，随着胆汁理化特性等基础研究的深入，胆结石溶石治疗有了较大的发展［3-7］。我国医务工作者为了寻找较好的溶石剂，曾先后对多种中药及1%去氧胆酸钠-EDTA-2Na单辛酯无机溶剂对胆结石进行了体外实验。近年来又采用了甲基正丁醚、复方甲基叔丁醚-二甲基亚砜等有机溶剂进行溶石，结果都不理想，有的对固醇型结石溶解效果好，而对色素型结石只有25%～40%的溶解效果。对胆结石的各种类型的溶解没有一个比较完整全面的报道。对胆结石患者胆汁与胆石中主要金属离子的测定表明，胆固醇结石和色素型结石患者胆汁中钙离子较正常高。氨羧配位剂是钙的良好配位剂，ETBE是胆固醇结石的较强熔剂，我们将二者配成混合溶剂，对各种结石进行溶石比较结果表明，对混合型溶石率达100%，对色素型结石溶解率达90%以上，均高于单纯使用甲基叔丁醚，而且溶石剂pH为8.5与生理胆汁的pH一致，溶解后残渣＜1.5mm。

通过使用EAS混合溶剂对各类结石的溶解行为的对比，可得出如下结论：①ETBE是固醇型结石的良好溶剂，其溶石率可达90%～100%，不仅溶石率高且可减轻对胆囊黏膜的刺激；②EGTA混合溶液是色素型结石良好溶剂，其溶石率达 80% ～90%；③EAS混合溶剂中ETBE-EGTA混-S是各类结石的良好溶剂，对各类结石的溶石率分别为，固醇型 90.02%，混合型Ⅰ100.00%，混合型Ⅱ99.18%，色素型95.73%。其主要原因是混合溶剂中各组分可选择性地溶解其易溶成分，氨羧混合物是钙的良好络合剂，尤其是配合5%NaOH溶液使其对胆红素钙具有很好的溶解性。ETBE对胆固醇及蛋白支架有良好的可溶性。因此，可获得满意的体外溶石实验结果。

本研究在该溶石剂中加入鸡内金汁可提高固醇型结石的溶石效果，中药学理论认为鸡内金汁有化石作用，而且对胆道黏膜无刺激，是一种良好的辅助溶石的药物。本研究目前只是体外溶石试验，在以后的研究过程中将对溶石剂进行动物毒理实验以及人体毒理试验。通过该实验有望能对肝胆外科手术后胆道残留结石溶解作出贡献。

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（本文编辑：刘斯静）

R331

B

1007-3205（2012）11-1309-03

2012-03-16；

2012-05-21

张建群（1954-），男，河北巨鹿人，河北省巨鹿县医院主治医师，从事肝胆外科疾病诊治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.11.028