解芳等

[摘要]目的：探索骨髓间充质干细胞（BMSCs）及成骨诱导后的骨髓间充质干细胞（OM-BMSCs）对同种异体的外周血单个核细胞（PBMCs）的免疫调节作用。方法：分离比格犬BMSCs，成骨诱导培养基（osteogenic medium，OM）进行成骨诱导，建立BMSCs、OM-BMSCs与同种异体PBMCs的共培养体系，分三种实验条件，共9组。A组：5×104受体PBMCs 加入5×104供体PBMCs共培养；B组：A组组分加入已铺被1×104/孔BMSCs的96孔板；C组：A组组分加入已铺被1×104/孔OM-BMSCs的96孔板；D组：5×104受体PBMCs加入植物血凝素A（PHA）刺激物；E组、F组：将D组组分按B、C组方式处理；G组：5×104受体PBMCs加入IL-2炎症因子；H组、I组：G组组分按B、C组方式处理。A、D、G组分别为三个实验条件的对照组，单独接种1×104/孔BMSCs、OM-BMSCs作为空白对照组Blank1组、Blank2组。以上各组分别培养120h后，应用CellTiter96 Aqueous检测各组PBMCs的增殖情况。结果：在各实验条件下与相应对照组相比较，BMSCs与OM-BMSCs均能抑制双向混合淋巴细胞反应（MLR）中PBMCs的增殖，均能抑制经PHA刺激后PBMCs的增殖，均能抑制经IL-2刺激后PBMCs的增殖（P<0.01）。结论：BMSCs及成骨分化的BMSCs对刺激细胞、PHA、IL-2刺激的同种异体PBMSs的增殖均表现为抑制效应，成骨分化后的骨髓间充质干细胞对同种异体免疫反应仍具有免疫调节作用。

[关键词]成骨分化；骨髓间充质干细胞；同种异体；免疫调节

[中图分类号]Q813.1[文献标识码]A[文章编号]1008-6455（2012）11-1976-05

近年来，随着组织工程的兴起和发展，应用骨髓间充质干细胞（BMSCs）构建组织工程骨已成为骨组织重建修复的一个新途径。骨髓间充质干细胞是一种具有很强自我更新能力的原始细胞，具有多向分化潜能，可分化为不同类型的细胞，如骨细胞、肌腱细胞、脂肪细胞、肌肉细胞等[1-4]，另外研究发现BMSCs免疫原性低且有免疫调节作用。它能抑制由非特异性丝裂原（PHA等）、炎症细胞因子（IL-2、Anti-CD3 Ab）等诱导的淋巴细胞增殖[5-8]。

自体BMSCs要达到一次治疗量，需要在体外大量培养扩增，其过程可能要花大约一个月的时间。……