林向飞　闵玮　朱晓芳　骆丹

[摘要]目的：观察中波紫外线（UVB）辐射后人原代角质形成细胞中环丁烷嘧啶二聚体（cyclobutane pyrimidine dimmers，CPDs）的生成和清除情况，以及没食子儿茶素没食子酸酯 （epigallocatechingallate，EGCG）干预对上述过程的影响。方法：以不同剂量UVB照射原代角质形成细胞后并加入EGCG干预处理，采用免疫组织化学法检测UVB照射后不同时段细胞中CPDs的产生和清除情况。结果： UVB照射后细胞中CPDs开始产生，1h左右达到高峰；CPDs在照光后4h内清除速率较快，4h后清除速率逐渐降低，至24hCPDs被基本清除。照光前后加入EGCG干预减少UVB引起的35.7%～42.9%CPDs产生（P<0.05）。结论：UVB可明显引起原代人角质形成细胞损伤，受损程度随辐射剂量增大而加重；EGCG可以减少UVB辐射所致的光产物的产生，加速光产物的清除。

[关键词]UVB辐射；人原代角质形成细胞；环丁烷嘧啶二聚体；EGCG

[中图分类号]Q813.1[文献标识码]A[文章编号]1008-6455（2012）11-1967-04

日光中和皮肤癌相关的紫外线可以分为UVA（320～400nm）、UVB（280～320nm）、UVC（200～280nm）。UVB可导致DNA的标志性损伤即光产物形成[1-2]，包括6-4光产物（（6-4）PPs）和嘧啶或环丁烷嘧啶二聚体（CPDs）。CPDs约占75%左右，是主要的光产物。这些DNA损伤如没有修复或修复不完善，可以产生基因突变，成为皮肤癌的初始改变。生物体天然固有切除和修复光产物的能力，这种切除修复能力会受到多种外界因素如药物的影响。现有研究表明绿茶提取物茶多酚（Teapol， TP）中的主要活性成分EGCG具有抗衰老、抗氧化、抗肿瘤和免疫调节等多种作用，既往我们已报道EGCG有较强的抗紫外线能力，但其对UVB辐射后人皮肤原代KC中光产物产生及清除的影响还未见报道[3-6]。本研究主要观察UVB辐射后人皮肤原代KC中CPDs产生和清除的情况，以及EGCG对上述过程的影响。

1材料和方法

1.1 材料与仪器：EGCG（美国Sigma生物公司）；K-SFM培养基（美国 GIBCO生物公司）；……