潘惠艳 赵 群 詹 阳 赵丽红 张卫华 吴玉梅

(1.首都医科大学附属北京妇产医院中心实验室，北京 100026;2.首都医科大学附属北京妇产医院妇瘤科，北京 100026;3.首都医科大学附属北京妇产医院病理科，北京 100026)

宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一，侵袭和转移是影响宫颈癌患者预后的关键因素。电压门控钠通道(voltage-gated sodium channels，VGSC)蛋白家族由九个成员组成，分别命名为Nav1.1～Nav1.9，其主要分布于神经、肌肉和神经内分泌细胞，负责细胞膜的兴奋和传播动作电位［1］。近年来，研究显示［2-3］VGSC在一些转移的癌细胞中表达，如Nav1.5亚型在乳腺癌、卵巢癌和结肠癌细胞中表达，Nav1.7亚型主要在前列腺癌细胞中表达，其与癌细胞的迁移和侵袭呈正相关。目前，国内外对VGSC在宫颈癌细胞中的研究较少，已发现在宫颈癌原代培养细胞中检测到VGSC电流，scn8a基因编码的产物Nav1.6亚型特异性阻止剂可抑制其电流，亦抑制细胞的侵袭［4］。首都医科大学附属北京妇产医院的前期研究［5］提示宫颈癌SiHa细胞株表达VGSC蛋白，但其表达亚型和作用仍不清楚。本研究采用RNA干扰(RNA interference，RNAi)技术，使用针对scn8a基因小干扰RNA(small interference RNA，siRNA)转染宫颈癌SiHa细胞，观察其对细胞增生、迁移和侵袭的影响，探讨VGSC在宫颈癌细胞中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1)细胞株:人宫颈癌细胞株SiHa细胞购自中国医学科学院基础医学研究所。

2)试剂:10%胎牛血清和DMEM培养液(美国Gibico公司);5'－荧光素氨基磷酸酯-siRNA(6-FAM-siRNA，上海吉玛制药技术有限公司合成);Trizol和转染试剂Lipofectamine 2000(美国Invitrogen公司);RTPCR试剂盒(美国Promega公司);兔抗人Nav1.6多克隆抗体(以色列Alomone labs公司);抗β－肌动蛋白(β-actin)抗体(美国Sigma公司);Matrigel胶(美国BD公司)。……