安徽农业大学生命科学学院 黄世霞 王在贵＊ 刘学诗

茶叶多糖（tea polysaccharides，TPS）是从茶叶中提取出来的多糖类复合物，具有降血糖、降血脂、抗氧化、增强免疫力等多种生物学功能 （招钰等，2007；李布青等，1996）。其相对分子质量为40000～100000，易溶于热水，不溶于高浓度的有机溶剂（徐仲溪和王坤波，2004）。茶多糖的溶解性是其性质的一项很重要的指标，一般多糖分子质量越大，溶解性越低，不利于多糖穿越多重细胞内膜系统，从而影响其生物活性（Chen等，2009）。而低分子质量的多糖易于肠壁细胞结合，具有抑制有害菌，阻止肠道毒素的吸收等生理功能。目前关于低分子质量的茶叶多糖的制备及其生理活性的研究仍鲜有报道。本研究利用酶法降解茶多糖降低其聚合度，并研究了最适酶解参数，以期为茶叶低聚糖的制备及其生理活性的研究提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 茶叶多糖（由本实验室提供），纤维素酶，木聚糖酶，β-葡聚糖酶（由某生物股份有限公司提供，于-30℃冰箱中保存）。柠檬酸、磷酸氢二钠、苯酚、酒石酸钾钠、羧甲纤维钠、3，5-二硝基水杨酸（DNS）。

1.2 方法

1.2.1 葡萄糖标准曲线的绘制 分别吸取0.1 mg/mL 葡 萄 糖 溶 液 0、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.8 mL依次加入试管中，分别补加入蒸馏水至1.5 mL。每管中加3 mL DNS于沸水中煮10 min，自来水冷浴冷却，加入10 mL蒸馏水稀释混匀，于550 nm处进行比色测定，用空白管调零点，测定OD550，以葡萄糖浓度为横坐标，以OD550为纵坐标绘制出标准曲线。每组2个平行。（注：每次新配制DNS试剂均需要重新绘制标准曲线）。

1.2.2 茶叶多糖最适降解酶的筛选 取5 mg/mL茶叶……