武汉工业学院动物科学与营养工程学院

动物营养与饲料科学湖北省重点实验室 窦茂鑫 赵迪 丁斌鹰 侯永清 吴涛＊

微生态饲用添加剂具有良好的生物学活性，能调节动物胃肠道微生物菌群的平衡，促进动物消化吸收、生长发育，提高饲料转化率和生产性能，增强动物免疫力，以及具有改善饲养环境和减少环境污染的独特作用（Gomze等，2007；王旭明等，2002）。芽孢乳酸菌因其同时具有乳酸菌和芽孢杆菌的优点而成为为理想的益生菌之一 （相菲和徐厚春，2009）。本试验对饲用芽孢乳酸菌的生物学特性进行研究，以期为微生态饲料添加剂的研发提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验菌株 试验益生菌：芽孢乳酸菌，由武汉泛华生物技术有限公司提供；试验致病菌：大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌，由华中农业大学国家农业微生物重点实验室提供。

1.1.2 培养基 普通琼脂培养基：酵母浸出物3 g，蛋白胨 5 g，NaCl 5 g，葡萄糖 15 g，琼脂 15 g，调整pH 7.2，定容至1000 mL。普通液体培养基：普通琼脂培养基中不加琼脂。

1.1.3 主要试剂 PBS缓冲液，用于菌液的稀释。

1.1.4 主要器材 电子天平 （沈阳龙腾电子有限公司），酸度计 （成都方舟科技开发公司），UV-1200 spectrophoto meter（美谱达仪器公司），立式超低温保温箱（海尔公司）。

1.2 试验方法

1.2.1 芽孢乳酸菌的复苏 将-20℃保存的菌株按1%的接种量接种于普通液体培养基中，在37℃和165 r/min条件下培养10～12 h，待浑浊后进行后续试验。

1.2.2 生长曲线测定 将复苏后菌液按5%的接种量接种于普通液体培养基中，在37℃和165 r/min条件下培养，以普通液体培养基作校正，测定不同时间段培养液的OD600值，前24 h每1 h一测，后36 h每2 h一测。……