王珊珊，马培翔

（1.山东省分析测试中心大型精密仪器重点实验室 山东 济南 250014；2.北京理工大学生命科学与技术学院 北京 100081）

单胺氧化酶（MAO, EC 1.4.3.4）是存在于细胞线粒体外膜上的，含有硫氢基的一种黄素蛋白[1]。其在体内的主要功能是催化内源性和外源性单胺类物质（如5-羟色胺、多巴胺和去甲肾上腺素等）的代谢[2]。在MAO的作用下，单胺类物质被氧化而产生脱氨基作用[3]：

单胺类物质在神经系统中主要以神经递质的形式存在，MAO通过氧化脱胺作用调节这些单胺类物质的含量，从而起到调节神经递质代谢的作用，因此MAO活力与抑郁症和许多神经系统退行性疾病有关，如帕金森症，老年痴呆症和抑郁症等，对其抑制剂的研究一直是治疗相关疾病的热点。

由于单胺氧化酶可以催化犬脲胺（Kynuramine）发生反应（如图1所示）[4]。生成荧光物质4-羟基喹啉（4-Hydroxyquinolin，4-HQ） ，因此可利用HPLC－荧光检测法来检测4-HQ生成量的变化，从而进一步得出MAO酶抑制剂的抑制效果。

本文在实验室条件下，利用从鼠肝中提取的单胺氧化酶，检测抑制剂的抑制效果，与液体闪烁计数等其它方法相比，方法简单安全，易于操作，稳定性好且灵敏度高。

图1 MAO催化Kynuramine的反应机理

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

甲酸铵（分析纯，北京市旭东化工厂），甲酸（色谱纯，迪马公司），Kynuramine（Sigma公司），4-Hydroxyquinolin（Sigma公司），Triton X-100（北京拜尔迪生物公司），Wistar大鼠购自军事医学科学院。

1.2 色谱条件

Agilent 1100系列四元泵和自动进样装置；Waters 474荧光检测器；色谱柱：ZORBAX ECLIPSE XDB-C18( 2.1×150 mm，5 μm)；流动相：甲醇：0.1%甲酸铵水溶液(25:75, v/v)，进样量2 μL，流速0.2 mL/min，室温；激发波长：315 nm，发射波长：380 nm。……