李庆杰,王怀生,王莲萍,赵昱玮,张莲珠,赵全成

(1.长春中医药大学附属医院,吉林 长春 130021；2.吉林天药药物研发有限公司,吉林 长春 130012；3.吉林省中医药科学院,吉林 长春 130021)

卷柏为卷柏科植物卷柏Selaginellatamariscina(Beauv.)Spring或垫状卷柏Selaginellapulvinata(Hook.etGrev.)Maxim.的干燥全草，味辛性平，具有活血通经功效，主要用于经闭、痛经，跌扑损伤等[1]。卷柏资源丰富,民间称为“九死还魂草、长生不老草、万年青”等，其中含有丰富的双黄酮，是该属植物的特征性成分，主要包括穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮、新柳杉双黄酮等化合物。双黄酮属天然多酚类抗氧化剂，具有抗脂质过氧化和清除自由基的作用，现代药理研究[2-4]表明，卷柏具有抗炎、抗病毒、镇痛、降血糖、抗痛风、增强人体免疫功能、抗衰老、抗肿瘤等作用，药材中的黄酮是发挥药效的主要成分。本实验采用正交设计法，以总黄酮和穗花杉双黄酮提取率为考察指标，对卷柏总黄酮的提取工艺进行了研究。

1 仪器与试药

LC-2010高效液相色谱仪(日本岛津)，SPD 10A型紫外检测器(日本岛津)，UV-1701紫外分光光度计(日本岛津)，分析天平(北京赛多利斯BSA224S)，超声波清洗器(北京天鹏TP-300)，恒温水浴。卷柏药材购自吉林省宏检医药药材公司，经鉴定为卷柏科植物卷柏 Selaginella tamariscina (Beauv.)Spring；穗花杉双黄酮对照品(自制，高效液相色谱面积归一化法测定，纯度为99.64%)；水为娃哈哈纯净水，甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 正交实验设计 选用正交表L9(34),分别以总黄酮和穗花杉双黄酮提取率作为考察指标，对卷柏总黄酮提取过程中影响较大的乙醇浓度(A)、提取次数(B)、乙醇倍数(C)提取时间(D)4个因素进行考察，每个因素3个水平，见表1。……