化纤通络颗粒对肝纤维化大鼠肝脏脂质过氧化水平及羟脯氨酸的影响

2012-04-25白静丽姜海燕刘庆彬

长春中医药大学学报 2012年2期

关键词：鳖甲匀浆化纤

白静丽，姜海燕，刘庆彬

(长春中医药大学附属医院，吉林长春 130021)

目前研究表明，肝纤维化的形成与氧自由基介导的肝损伤有关，其中SOD、MDA及GSH-PX的异常与发病关系尤为密切。本研究通过观察化纤通络颗粒对肝纤维化大鼠血清SOD、MDA、GSH-PX和HYP的影响，进一步探讨其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物正常雄性Wistar大鼠60只(清洁级)，体质量(220±20)g，吉林大学实验动物中心提供。

1.2 药品及试剂化纤通络颗粒(由丹参、三七、地龙、虎杖、大黄、鳖甲、黄芪、当归组成)，由长春中医药大学附属医院制剂室制备；复方鳖甲软肝片:福瑞制药内蒙古集宁制药厂生产，用蒸馏水溶解为0.3 g/mL的溶液，冷藏备用。四氯化碳(CCl4分析纯):北京北化精细化学品有限责任公司；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)试剂盒购自南京建成生物制品公司。

1.3 动物模型的建立受试大鼠随机分为4组:正常对照组(15只)，模型组(15只)，复方鳖甲软肝片组(15只)，化纤通络颗粒组(15只)。正常喂养1周后，应用40%CCl4豆油溶液，皮下注射给药，首次按0.5 mL/100 g，以后按0.3 mL/100 g体质量，每周注射2次，连续8周[1]。

1.4 动物分组正常对照组：从实验第1天开始，灌胃生理盐水1.5 mL/100 g，每日1次；模型组：造模同时，每天灌服等量生理盐水；阳性对照组：造模同时，灌服复方鳖甲软肝片溶液1.5 mL/100 g，日1次；治疗组：造模同时开始每天以1.5 mL/100 g灌服化纤通络颗粒溶液，直至实验结束。

1.5 标本的采集各组于8周末，禁食12 h后断头取血，离心，取血清，-20 ℃保存，留做血清学检查；取血后立即去头取肝，一部分迅速投入液氮，之后转入-70 ℃冰箱保存，备肝组织匀浆，测组织生化。

1.6 实验方法肝匀浆制备：肝组织解冻后，生理盐水反复冲洗，滤纸吸干，切取小块，电子分析天平称重(100～300 mg)，置于试管内，按1∶9加入生理盐水，高速分散器匀浆，低温高速离心机3 000 r/15 min，取上清液，以上操作均于冰浴中进行。按试剂盒说明进行SOD、MDA、GSH-PX检测。

2 结果

2.1 对肝纤维化大鼠SOD、MDA和GSH-PX的影响见表1。

2.2 对肝纤维化大鼠HYP含量的影响见表2。

3 讨论

化纤通络颗粒是根据中医传统理论和多年临床探索研制而成的复方中药制剂，具有保肝降酶，改善肝脏微循环，降低细胞因子等水平，修复增生变性的肝纤维结缔组织，保护肝细胞和抑制胶原合成的作用。方中丹参、三七、地龙活血化瘀、益气养血通络；虎杖清热利湿、解毒活血；大黄活血化瘀、通腑泄热，配以黄芪益气升阳、鼓舞气机，生地黄滋阴补肾，二药合用扶正补虚。诸药合用共奏化纤通络之功。